Ключова разлика – HPLC срещу LCMS
Нека първо да разгледаме значението на HPLC и LCMS, преди да анализираме разликата между HPLC и LCMS. Хроматографията е техника за разделяне в химичния анализ, при която съставките на пробата се разделят по време на преминаване през хроматографска среда. Също така включва взаимодействие с пробата, стационарна фаза и подвижна фаза. HPLC означава високоефективна течна хроматография и се използва като метод за течна хроматография в аналитичната химия. Комбинацията от течна хроматография и масспектроскопия (LCMS) е разработена за количествен анализ на избрани биомолекули и е много чувствителна, точна и специфична процедура за анализ в сравнение с HPLC. Това е ключовата разлика между HPLC и LCMC. Тази статия ще ви запознае с HPLC и LCMC, които се занимават с химичен анализ и ще обсъди разликите между HPLC и LCMS.
Какво е HPLC?
Високоефективната течна хроматография (HPLC) е популярна техника за разделяне в аналитичната химия. Използва се главно за разделяне на компонентите, за идентифициране и количествено определяне на всеки компонент в смес. По-рано този метод беше известен като течна хроматография с високо налягане, тъй като зависеше от помпи за поток на течен разтворител под налягане, съдържащ сместа от пробата през колона, пълна с твърд адсорбиращ материал. Всяка съставка в пробната смес взаимодейства по различен начин с твърдия адсорбентен материал, което води до различни скорости на потока за различните съставки. Това може да доведе до разделяне на съставките, докато изтичат от HPLC колоната.
HPLC се използва за различни приложения като анализ на нивата на витамин D в кръвта, незаконна употреба на наркотици от спортисти чрез откриване на остатъци от лекарства в тяхната урина, сортиране на съставките на сложна биологична проба за изследователски цели и анализ и производство на фармацевтични продукти.
Какво е LCMS?
Течна хроматография–масспектрометрия (LCMS) е аналитична техника, която съчетава способностите за физическо разделяне на течната хроматография с възможностите за масов анализ на масспектрометрията (MS). Течната хроматография е техника за разделяне, а масспектрометрията се използва за анализиране на съотношението маса-заряд на заредените частици. Физическото разделяне обикновено се постига чрез HPLC и алтернативно, LCMS, известен също като HPLC-MS. LCMS е доминираща аналитична техника, която има много висока точност, чувствителност и специфичност в сравнение с HPLC. По този начин той е полезен в много приложения като изследователски цели, анализ на лекарства, анализ на храни и т.н. LCMS се използва главно за разделяне, за откриване, идентифициране и количествено определяне на биохимичните свойства на конкретна проба в присъствието на сложни химически смеси.
Каква е разликата между HPLC и LCMC?
Акроним и дефиниция на HPLC и LCMC
HPLC: HPLC означава високоефективна течна хроматография. Това е техника за разделяне, която се използва главно за разделяне на компонентите, за идентифициране и количествено определяне на всеки компонент в смес.
LCMS: LCMS означава течна хроматография и масспектрометрия. Това е аналитична техника, която съчетава способностите за физическо разделяне на течната хроматография с възможностите за масов анализ на масовата спектрометрия (MS).
Характеристики на HPLC и LCMC
Класификация
HPLC: Това е метод само за течна хроматография.
LCMS: Това е комбинация от метод на течна хроматография и метод на масспектрометрия.
Ефективност
HPLC: В сравнение с LCMS, HPLC анализът е по-малко ефективен и по-бавен.
LCMS: В сравнение с HPLC, LCMS анализът е ефективен и по-бърз.
Чувствителност
HPLC: В сравнение с LCMS, HPLC анализът е по-малко чувствителен.
LCMS: В сравнение с HPLC, LCMS анализът е по-чувствителен.
Специфичност
HPLC: В сравнение с LCMS, HPLC анализът е по-малко специфичен.
LCMS: В сравнение с HPLC, LCMS анализът е по-специфичен.
Точност
HPLC: HPLC дава по-малко точни резултати от LCMS за определяне на някои химикали.
LCMS: LCMS дава по-точни резултати от HPLC за определяне на някои химикали.
Компонент
HPLC: HPLC може да се разглежда като компонент на LCMS.
LCMS: LCMS не може да се счита за компонент на HPLC.
Източник на йони
HPLC: Източник на йони не съществува в HPLC инструмента.
LCMS: Източникът на йони присъства в LCMS инструмента.
Приложения
HPLC: Йони, полимери, органични молекули и биомолекули могат да бъдат анализирани с помощта на HPLC.
LCMS: Могат да се анализират органични молекули и биомолекули. За разлика от HPLC, LCMS може да се използва за изследване на непълно разтворени смеси.
Операция
HPLC: Диаграмата на HPLC инструмент е дадена на фигура 1 и обикновено включва автосамплер, помпи и детектор. Устройството за вземане на проби въвежда сместа от пробата в подвижната фаза (смес от разтворители под налягане като вода, ацетонитрил и/или метанол), която я прехвърля в колоната. Помпите доставят желания поток и състав на подвижната фаза през колоната. Колоната е пълна с адсорбент, който е зърнеста твърда частица като силициев диоксид или полимери. Детекторът произвежда сигнал, пропорционален на количеството на присъстващите съставки на пробата в колоната, което позволява количествено измерим анализ на избраните съставки на пробата. HPLC инструментът се управлява и анализът на данните се осигурява от цифров микропроцесор и потребителски софтуер.
Фигура 1: Диаграма на HPLC инструмент
LCMS: Диаграмата на LCMS инструмента е дадена на фигура 2. Екстрактът от пробата се вкарва в колоната, състояща се от HPLC. Тази колона запазва пробни метаболити въз основа на физически характеристики и различни метаболити протичат към масспектрометъра на различни интервали от време. Масспектроскопията се използва за оценка на масите на частиците, за определяне на елементарното подреждане на молекула и за изясняване на структурите на молекулата. Пробата обаче трябва да се йонизира, за да се генерират заредени молекули, за да се определят техните съотношения маса-заряд. Следователно, вместо HPLC инструменти, LCMS се състои от допълнителни три модула като източник на желязо, масов анализатор и детектор. Източник на йони може да трансформира пробата от газова фаза в йони, а масов анализатор да групира йоните по техните маси с помощта на електромагнитни полета. Накрая детектор количествено определя стойностите и предоставя данни за всеки йон, присъстващ в пробата. Техниката LCMS може да се използва както за качествени, така и за количествени приложения.
Фигура 2: Диаграма на LCMS инструмент
В заключение, HPLC е метод за течна хроматография, докато LCMS е комбинация от течна хроматография и масспектрометрия. И двете техники за анализ имат различни характеристики, но могат да се използват за идентифициране и количествено определяне на хранителни състави, фармацевтични продукти и други биоактивни молекули.
