Ключовата разлика между HPLC и бързата HPLC е, че налягането на помпата, което използваме за HPLC, е около 40 MPa, докато налягането на помпата за бърза HPLC е около 3-5 MPa.
Най-разпространената техника, която използваме за разделяне на компоненти на смес е „течна хроматография“. Има няколко техники за постигане на тази цел, от които HPLC е много популярна. HPLC означава високоефективна течна хроматография, която идентифицира, количествено определя и разделя компонентите на течна смес по бърз и ефективен начин. Бързата HPLC е специално приложение на HPLC, което напоследък привлече вниманието на онези, които участват в изследването на разтвори.
Какво е HPLC?
HPLC е високоефективна течна хроматография. Той използва високо налягане, за да изтласка разтворителите, така че да преминат през колона. Също така, това е идеален начин за разделяне и изследване на различни съединения като аминокиселини, нуклеинови киселини, въглехидрати, стероиди, антибиотици и въглеводороди. HPLC има много предимства пред други методи за разделяне на смеси като по-висока разделителна способност и по-бърз анализ. Той премахва необходимостта от преопаковане и регенериране и предлага по-добър контрол върху параметрите и по този начин повишава ефективността на разделянето. В идеалния случай HPLC е подходящ за широкомащабни приложения, тъй като може да разделя много малки частици и позволява използването на високи налягания, които улесняват лесното протичане на разтворителите.
Фигура 01: HPLC колона
Накратко, методът на работа на HPLC техниката е както следва. Първо, трябва да въведем пробата в потока от подвижна фаза в дискретни малки количества с помощта на помпа. Налягането на помпата трябва да се поддържа на 40 MPa. Този поток от подвижна фаза се просмуква през колоната на HPLC. След това компонентите в пробата също преминават през колоната. Въпреки това, техните скорости на движение се различават една от друга поради разликата във взаимодействията между компонентите на пробата и адсорбента вътре в колоната. Ние наричаме този адсорбент стационарна фаза, защото той се намира вътре в колоната (не се движи). След това, в края на колоната, можем да съберем пробата, която се елуира от колоната, като по този начин можем да съберем компонентите в пробата отделно.
Какво е Fast HPLC?
Наскоро изследователи от изследователския институт Schering Plough разработиха бърза HPLC техника, която е усъвършенствана версия на HPLC, тъй като позволява още по-бързо отделяне на съединения от смес. Също така, известна като бърза HPLC, тази техника използва 2,7 um силициеви частици със слято ядро, които са направени чрез сливане на 0,5 um порест силициев диоксид върху твърда силициева частица. Тези уникално направени частици правят процедурата на разделяне много бърза и това също при ниско противоналягане в сравнение с това, което използваме в HPLC.
Фигура 02: FPLC апарат
Fast HPLC дава резултати, сравними с UPLC, но учените смятат, че тази техника е по-добра, тъй като не изисква много скъпо оборудване за свръхвисоко налягане. Страхотното е, че бързата HPLC не изисква никакви нови лабораторни протоколи.
Каква е разликата между HPLC и Fast HPLC?
HPLC е високоефективна течна хроматография, а бързата HPLC е усъвършенствана форма на високоефективна течна хроматография. Ключовата разлика между HPLC и бързата HPLC е, че налягането на помпата, което използваме за HPLC, е около 40 MPa. Докато налягането на помпата за бърз HPLC е около 3-5 MPa. Освен това можем да разделяме различни съединения като аминокиселини, нуклеинови киселини, въглехидрати, стероиди, антибиотици и въглеводороди с помощта на HPLC техниката, докато бързата HPLC техника се използва главно за разделяне на протеини.
Инфографиката по-долу представя повече информация за разликата между HPLC и бърза HPLC.
Резюме – HPLC срещу бърз HPLC
HPLC е техника на течна хроматография, която стана много популярна в целия свят. Fast HPLC е нова версия на HPLC, изследователи от Schering Plough Institute разработиха тази нова техника. Ключовата разлика между HPLC и бързата HPLC се крие в налягането на помпата, което използваме за разделянето. Това е; налягането на помпата, което използваме за HPLC, е около 40 MPa. Но налягането на помпата за бърз HPLC е около 3-5 MPa.
