Ключовата разлика между HPLC и UPLC е, че HPLC позволява анализ на частици с размер около 5 микрометра, докато UPLC позволява много по-малки частици около 2 микрометра.
HPLC и UPLC са техники за течна хроматография, които са полезни при разделянето на компонентите на съединение. За да знаем разликата между HPLC и UPLC, първо трябва да знаем какво е HPLC. Това е така, защото UPLC е специална версия на HPLC и можем лесно да я разберем, ако знаем какво е HPLC.
Какво е HPLC?
Терминът HPLC означава високоефективна течна хроматография. Това е техника, която можем да използваме за разделяне на различни съставки на съединение. Също така, това е най-широко използваната техника за идентифициране, количествено определяне и разделяне на компонентите на смес. Освен това тази техника използва високо налягане за изтласкване на разтворители през колоната. Освен това, основните приложения на HPLC са в биохимията за анализ на съставките на съединение. Това е идеален начин за разделяне и идентифициране на аминокиселини, нуклеинови киселини, протеини, въглеводороди, пестициди, въглехидрати, антибиотици, стероиди и безброй други неорганични вещества.
Фигура 01: HPLC система в лаборатория
Накратко, методът на работа на HPLC техниката е както следва. Първо, трябва да въведем пробата в потока от подвижна фаза в дискретни малки количества с помощта на помпа. Налягането на помпата трябва да се поддържа на 40 MPa. След това този поток от подвижна фаза се просмуква през колоната на HPLC. Освен това компонентите в пробата преминават през колоната. Въпреки това, техните скорости на движение са различни една от друга. Тази разлика възниква поради разликата във взаимодействията между компонентите на пробата и адсорбента вътре в колоната. Ние наричаме този адсорбент стационарна фаза, защото той се намира вътре в колоната (не се движи). Второ, в края на колоната можем да съберем пробата, която се елуира от колоната. Там можем да определим разликите във времето на задържане за всеки компонент в пробата.
Какво е UPLC?
Терминът UPLC означава Ultra High-Performance Liquid Chromatography. Това е вариант на HPLC, но методът на работа е същият. Въпреки това, за разлика от HPLC, този метод позволява да се анализират много малки частици, като малки частици от 2 микрометра.
Фигура 02: UPLC устройство
Освен това осигурява по-бърз анализ. При тази техника използваме налягане на помпата от 100 MPa за вкарване на пробата в колоната. Следователно това високо налягане потвърждава, че цялата проба е въведена в колоната. Следователно това е много ефективно в сравнение с HPLC.
Каква е разликата между HPLC и UPLC?
Терминът HPLC означава високоефективна течна хроматография, докато терминът UPLC означава ултра високоефективна течна хроматография. Следователно техниката UPLC е разработена версия на HPLC. По този начин методът на работа е еднакъв и за двете техники. Въпреки това, UPLC е по-ефективен в сравнение с HPLC, тъй като използва високо налягане на помпата; налягането на помпата за HPLC е 40 MPA, докато е 100 MPa за UPLC. Следователно това е разлика между HPLC и UPLC. Преди всичко ключовата разлика между HPLC и UPLC е, че HPLC позволява анализ на частици с размер около 5 микрометра, докато UPLC позволява много по-малки частици около 2 микрометра.
Резюме – HPLC срещу UPLC
UPLC е форма на HPLC. Следователно методите на работа са еднакви. Но можем да намерим някои подобрени функции в UPLC в сравнение с HPLC. Следователно има известна разлика между HPLC и UPLC. Въпреки това ключовата разлика между HPLC и UPLC е, че HPLC позволява анализ на частици с размер около 5 микрометра, докато UPLC позволява много по-малки частици около 2 микрометра.
