Ключова разлика – HPLC срещу HPTLC
Ключовата разлика между HPLC и HPTLC е, че HPLC позволява количествено разделяне на компонентите в проба, докато HPTLC не позволява количествено разделяне на компоненти в проба.
Хроматографията е метод за физическо разделяне, който се използва за разделяне и идентифициране на компонентите в смес. Както HPLC, така и HPTLC са хроматографски техники. HPLC е високоефективна течна хроматография. HPTLC е високоефективна тънкослойна хроматография.
Какво е HPLC?
HPLC е високоефективна течна хроматография. Това е аналитична техника, използвана за разделяне, идентифициране и количествено определяне на компоненти в смес. При тази техника пробата се разтваря в подходящ разтворител. След това разтворителят с пробата преминава през помпа с определено налягане. Помпата е пълна с твърд адсорбиращ материал. Тогава някои компоненти се свързват силно с абсорбиращия материал, докато други компоненти се свързват хлабаво. Това кара компонентите да имат различни дебити през помпата. Следователно компонентите могат да бъдат разделени лесно.
Фигура 01: HPLC система
Адсорбиращият материал, който запълва помпата, е известен като неподвижна фаза. Разтворителят с разтворената проба е известен като подвижна фаза. Помпата, използвана в тази техника, се нарича колона. Колоната е пълна с адсорбиращ материал, най-често силициеви частици. Размерът на тези частици може да варира от 2-50 μm. Процесът на разделяне се влияе от състава на подвижната фаза и температурата на системата. Взаимодействията между неподвижната фаза и компонента в пробата могат да бъдат хидрофобни взаимодействия, дипол-диполни взаимодействия, йонно свързване и др.
Работното налягане на HPLC е значително по-високо от това на традиционната течна хроматография. Лежи около 50-350 бара. Разликата между течна хроматография и HPLC е, че при течната хроматография пробата пада през колоната под действието на гравитацията, докато при HPLC пробата е под налягане през колоната. Размерът на колоната и абсорбиращите частици също са много малки в сравнение с традиционната течна хроматография. Въпреки това разделителната способност, дадена от HPLC техниката, е по-добра.
Какво е HPTLC?
HPTLC е високоефективна тънкослойна хроматография. Това е усъвършенстваната и автоматизирана форма на традиционния TLC. Тази техника осигурява ефективна резолюция за кратък период от време. При този метод на анализ пробата и референтната стойност могат да бъдат анализирани едновременно, което позволява пробата да бъде сравнена с еталонната. Дава подобрена аналитична точност в сравнение с други хроматографски техники. Времето, необходимо за анализа, е по-малко. Техниката е евтина.
Фигура 02: Анализ на хранителни бои с помощта на HPTLC
Методът HPTLC е прост процес и етапът на подготовка на пробата също е елиминиран (В традиционната TLC стъпката на подготовка на пробата е включена преди разделянето. Тази стъпка включва почистване и обогатяване). Разтворителят може да се използва директно без предварителна обработка, въпреки че други хроматографски техники изискват предварителна обработка като дегазиране, филтриране и др.
Адсорбиращият материал, използван в HPTLC, е силициев диоксид с много малки размери на частиците. При традиционната TLC размерът на частиците на силициевия диоксид е 5-20 μm, докато при HPTLC е 4-8 μm. Пробата се нанася върху плаката HPTLC с помощта на апликатор. Осигурява равномерно и безопасно приложение. След това плочите се поставят в камера с подвижна фаза. Камерата трябва да е наситена с парите на подвижната фаза. След HPTLC процеса петната, които са се преместили, могат да бъдат открити. При откриване на петна върху плаката, HPTLC техниката използва подходяща UV област или йодна камера.
Каква е разликата между HPLC и HPTLC?
HPLC срещу HPTLC |
|
| HPLC е високоефективна течна хроматография. | HPTLC е високоефективна тънкослойна хроматография. |
| Техника | |
| В HPLC подвижната фаза с разтворителя преминава през колона, пълна с неподвижната фаза. | При HPTLC пробата се нанася върху плоча за TLC и се поставя вътре в камера, съдържаща подвижната фаза; след това пробата се оставя да мигрира нагоре в плаката заедно с подвижната фаза. |
| Измерване | |
| В HPLC, разликите между дебитите на компонентите през колоната се използват за разделяне на компонентите в пробата. | В HPTLC разликите между разстоянията, изминати от всеки компонент в пробата, се използват за разделяне на компонентите в пробата. |
| Количествено разделяне | |
| HPLC позволява количествено разделяне на компонентите в проба. | HPTLC не позволява количествено разделяне на компонентите в проба. |
Резюме – HPLC срещу HPTLC
HPLC и HPTLC са две хроматографски техники. Ключовата разлика между HPLC и HPTLC е, че HPLC позволява количествено разделяне на компоненти в проба, докато HPTLC не позволява количествено разделяне на компоненти в проба.
