Ключовата разлика между протеиновия анализ на Брадфорд и Лоури е, че протеиновият анализ на Брадфорд се основава на изместването на абсорбцията на багрилото Coomassie brilliant blue G-250, докато протеиновият анализ на Лоури се основава на реакцията на медни йони (Cu+) йони произведени чрез окисление на пептидни връзки с реагент Folin–Cioc alteu.
Анализът е аналитична техника, която помага да се характеризират основните функционални компоненти на пробата. Следователно анализът може да бъде или качествен, или количествен тест. Много области, включително лабораторна медицина, фармакология, биология на околната среда, молекулярна биология, биохимия и имунология, използват този вид анализи рутинно. Протеиновият анализ на Брадфорд и Лоури са два биохимични анализа, които определят концентрацията на протеин в разтвор на проба. И двата анализа използват колориметрични техники за предоставяне на резултати.
Какво представлява тестът за протеин на Брадфорд?
Протеиновият анализ на Брадфорд е бърза спектроскопска аналитична процедура за анализ на протеини. Показва висока точност при измерване на концентрацията на протеин в разтвор. Марион Брадфорд въвежда тази процедура през 1976 г. В този анализ общата реакция се основава на аминокиселинния състав на измерените протеини. С други думи, протеиновият анализ на Брадфорд е колориметричен анализ. Използва багрилото Coomassie brilliant blue. Следователно, този колориметричен протеинов анализ зависи от изместването на абсорбцията на багрилото. Coomassie brilliant blue G-250 съществува в три формата: катионен (червен), анионен (син) и неутрален (зелен). По време на киселинни условия червената форма на багрилото се превръща в синя. Потвърждава свързването на протеина. Ако протеинът липсва, разтворът може да остане кафяв.
Фигура 01: Тест за протеин на Брадфорд
Протеиновият анализ на Брадфорд се различава от другите протеинови анализи, тъй като е по-малко податлив на влияние на различни химични съединения, присъстващи в протеиновия разтвор. Тези съединения включват натрий, калий, глюкоза и захароза и др.
Какво представлява тестът за протеин на Lowry?
Протеиновият анализ на Lowry е биохимичен анализ, използван за определяне на общото ниво на протеин в разтвор. Оливър Х. Лоури е човекът, който разработи този реагент през 1940 г. Процедурата изобразява общата концентрация на протеин в разтвора чрез промяна на цвета, която е пропорционална на концентрацията на протеин в разтвора. Следователно, това също е колориметричен протеинов анализ.
Реакцията между медни йони (Cu+), получени от окисляването на пептидни връзки и реагент Folin–Cioc alteu, е в основата на тази процедура. Също така, този реагент съдържа фосфомолибденова киселина и фосфорно-волфрамова киселина. Реакционният механизъм на анализа на Lowry протеин обаче не е добре разбран. Но това включва окисление на цистеинови, триптофанови и тирозинови остатъци чрез редукция на реагента Folin–Cioc alteu.
Фигура 02: Анализ на Lowry протеин
Остатъците от цистеин допринасят за абсорбцията, наблюдавана при теста на Lowry протеин и реакцията води до брилянтна синя молекула; хетерополи молибденово синьо. Редукцията на тази молекула се измерва чрез абсорбция при 660 nm. Следователно, концентрацията на цистеинови и триптофанови остатъци, които редуцират реактива на Фолин-Чиокалтеу, извежда общата концентрация на протеина в разтвора.
Какви са приликите между протеиновия анализ на Брадфорд и Лоури?
- Протеинови анализи на Брадфорд и Лоури определят концентрацията на протеин в разтвор.
- И двата метода са колориметрични.
- Освен това, чувствителността на двата метода е висока.
Каква е разликата между протеиновия анализ на Брадфорд и Лоури?
Протеиновият анализ на Брадфорд и Лоури са два вида анализи, които определят концентрацията на протеин в разтвор. Протеиновият анализ на Брадфорд разчита на изместването на абсорбцията на багрилото Coomassie brilliant blue G-250, докато протеиновият анализ на Лоури зависи от реакцията на медни йони, получени от окисляването на пептидни връзки, с реактива на Фолин-Чиокалтеу. И така, това е ключовата разлика между протеиновия анализ на Брадфорд и Лоури. Протеиновият анализ на Bradford отнема 15 минути, за да даде резултат, докато протеиновият анализ на Lowery отнема 40-60 минути, за да даде резултат. По този начин, това е друга разлика между протеиновия анализ на Брадфорд и Лоури. Освен това протеиновият анализ на Брадфорд зависи от аминокиселинния състав, докато протеиновият анализ на Лоури зависи частично от аминокиселинния състав. Следователно, това също е разлика между протеинов анализ на Брадфорд и Лоури.
По-долу инфографиката предоставя повече подробности за разликата между теста за протеини на Брадфорд и Лоури.
Обобщение – Брадфорд срещу протеинов анализ на Лоури
Анализът е аналитична техника, използвана за характеризиране на основния функционален компонент на пробата. Протеиновият анализ на Брадфорд и Лоури са два вида протеинови анализи, които функционират при колориметрични техники. Протеиновият анализ на Брадфорд и Лоури определя концентрацията на протеин в разтвор. Ключовата разлика между Bradford и Lowry Protein Assay обаче се крие в използваната от тях колориметрична техника. Протеиновият анализ на Bradford използва Coomassie brilliant blue G-250, докато протеиновият анализ на Lowry използва йони на медни йони (Cu+) и реагент Folin–Cioc alteu. Освен това методът на Брадфорд дава бързи резултати от анализа на протеина на Лоури. И двата метода обаче са силно чувствителни и са обект на смущения от различни вещества.
