Ключовата разлика между 1D и 2D гел електрофореза са свойствата, използвани за разделяне на протеини при гел електрофореза. 1D гел електрофореза разделя протеини само въз основа на молекулното тегло, докато 2D гел електрофореза разделя протеини въз основа на неговата изоелектрична точка и молекулно тегло.
Разделянето на протеини чрез гел електрофореза е важна техника за характеризиране на протеини. Протеините имат различни свойства; следователно разделянето е по-сложно в сравнение с разделянето на ДНК чрез електрофореза в агарозен гел.
Какво е 1D гел електрофореза?
1D гел електрофореза, известна още като едноизмерна гел електрофореза, е метод за разделяне на протеини въз основа на молекулното тегло. Разделянето на протеини се извършва главно чрез електрофореза с полиакриламиден гел. Въз основа на концепцията за гел електрофореза, молекулите се разделят според свойствата си на молекулно тегло и заряд.
Следователно, за да се даде равномерен заряд на протеините, третирането с натриев додецил сулфат (SDS) се извършва преди гел електрофорезата. SDS денатурира протеините и осигурява равномерен отрицателен заряд на протеина; когато се прилага прилагането на електрическото поле, протеините мигрират към положителния терминал въз основа на тяхното молекулно тегло. Така при разделянето се разглежда само един имот. Ето защо този метод се нарича 1D гел електрофореза.
Фигура 01: 1D гел електрофореза
По време на 1D гел електрофореза, протеините се разделят въз основа на тяхното молекулно тегло. В това отношение молекулите с по-ниско тегло мигрират по-бързо в гела в сравнение с протеините с високо молекулно тегло. Така протеините с високо тегло остават близо до ямките.
Какво е 2D гел електрофореза?
2D гел електрофореза или двуизмерна гел електрофореза разделя протеини въз основа на две свойства. Двете свойства са изоелектричната точка на протеина и молекулното тегло. Този метод за разделяне на протеини увеличава разделителната способност на разделянето на протеини. Изоелектричната точка на протеина зависи от pH, при което протеинът е неутрален.
Фигура 02: 2D гел електрофореза
По този начин, при 2D гел електрофореза, протеинът се оставя да работи при фиксиран pH градиент в първото измерение. Във второто измерение протеините се разделят с помощта на вертикална или хоризонтална електрофореза с полиакриламиден гел. Така протеините се разделят според тяхното молекулно тегло във второто измерение.
Освен това този метод на гел електрофореза увеличава разделителната способност на разделянето на протеини. Следователно отделените протеини са по-чисти. Въпреки това цената на техниката е много по-висока от едноизмерната гел електрофореза.
Какви са приликите между 1D и 2D гел електрофореза?
- И двете техники разделят протеините.
- Следователно, те са важни при характеризирането на протеините.
Каква е разликата между 1D и 2D гел електрофореза?
Ключовата разлика между 1D и 2D гел електрофореза е, че 1D гел електрофореза разделя протеини само на базата на молекулното тегло, докато 2D гел електрофореза разделя протеини както на изоелектрична точка, така и на молекулно тегло. Поради тази основна разлика между 1D и 2D гел електрофореза, разделителната способност на разделянето на протеините и цената на двете техники също варират.2D гел електрофореза показва висока резолюция от 1D гел електрофореза. Въпреки това, 2D гел електрофореза е по-скъпа от 1D гел електрофореза.
Инфографиката по-долу обобщава разликата между 1D и 2D гел електрофореза.
Обобщение – 1D срещу 2D гел електрофореза
Разделянето на протеини зависи от много фактори. 1D гел електрофореза разделя протеините само на базата на молекулното тегло. Въпреки това, двуизмерната или 2D гел електрофореза увеличава разделителната способност на протеиновото разделяне. Освен това, 2D гел електрофореза разделя протеините на базата на изоелектричната точка и молекулното тегло. Следователно тези данни са важни за последващата обработка на протеини и в областта на протеомиката. Така това е обобщението на разликата между 1D и 2D гел електрофореза.