Ключова разлика – оцветяване по грам срещу култура
Оцветяването по Грам е техника на оцветяване, която се извършва, за да се разграничат бактериите в две групи според дебелината на пептидогликановия слой в клетъчната им стена. Културата е метод за отглеждане и поддържане на микроорганизми в лабораторни условия за различни анализи. Ключовата разлика между оцветяването по грам и културата е тяхната функция; грам щам техника на оцветяване на бактерии, където културата е метод за отглеждане и поддържане на микроорганизми.
Какво е оцветяване по Грам?
Оцветяването по Грам е важна техника за диференциално оцветяване, използвана за идентифициране на бактерии в микробиологията. Тази техника е въведена от датския бактериолог Ханс Кристиан Грам през 1884 г. Оцветяването по Грам категоризира бактериите в две основни групи: грам положителни и грам отрицателни; те са много важни при бактериалната класификация и идентификация. Оцветяването по Грам се извършва като начална стъпка за бактериална характеристика.
Бактериите са групирани въз основа на разликите в клетъчната им стена. Грам-положителните бактерии съдържат дебел пептидогликанов слой в клетъчната си стена, докато грам-отрицателните бактерии съдържат тънък пептидогликанов слой в клетъчната си стена, както е показано на фигура 01. Резултатът от оцветяването по грам ще се основава на разликата в дебелината на пептидогликановия слой на клетъчна стена.
Фигура 1: Грам положителни бактерии и грам отрицателни бактерии
Оцветяването по грам се извършва с помощта на четири различни реагента, а именно; първично оцветяване, оцветител, обезцветяващ агент и контра оцветяване. Кристално виолетово и сафранин служат съответно като основно и контра оцветяване, докато грамовете йод и 95% алкохол служат съответно като оцветител и обезцветител.
Основни стъпки за оцветяване по грамове
- Бактериална намазка се приготвя върху чисто предметно стъкло, топлинно се фиксира и охлажда.
- Намазката се залива с кристално виолетово за 1 – 2 минути.
- Намазката се изплаква с бавно течаща чешмяна вода, за да се отстранят излишните петна.
- Grams йод се нанася върху цитонамазката за 1 минута.
- Намазката се изплаква с бавно течаща чешмяна вода
- Намазката се измива с 95% алкохол за 2 – 5 секунди и се изплаква с бавно течаща чешмяна вода.
- Натривката се оцветява насрещно със сафранин за 1 минута
- Намазката се изплаква с бавно течаща чешмяна вода, изсушава се и се наблюдава под микроскоп.
В края на оцветяването по грам грам отрицателните бактерии ще се наблюдават в розов цвят, докато грам положителните бактерии ще се наблюдават в лилав цвят, както е показано на фигура 02. Резултатът от оцветяването по грам се определя от дебелината на пептидогликановия слой в клетъчната им стена. По време на етапа на обезцветяване, първичното оцветяване и щипката лесно се отстраняват от грам-отрицателните бактерии и стават безцветни, тъй като имат тънък пептидогликанов слой. Първичното оцветяване се запазва в грам положителните бактерии, тъй като те имат дебел пептидогликанов слой. Противооцветяването няма да е ефективно за грам положителни бактерии поради задържането на първичното оцветяване. Така че грам положителните бактерии ще бъдат видими в основния цвят на петна, т.е. лилав цвят. Противооцветяването ще оцвети грам-отрицателните бактерии и ще бъде видимо в избран цвят, който е цветът на сафранин. Следователно е лесно да се категоризират бактериите в две групи чрез оцветяване по грам и е ценно при бактериалната диференциация и идентификация.
Фигура 2: Щам Грам
Какво е култура?
Микробната култура е метод за култивиране и поддържане на микроорганизми в лабораторни условия за различни цели. Културите се отглеждат в твърда, полутвърда и течна среда в зависимост от вида и целта на култивирането на микроорганизма. Културите са снабдени с необходимите хранителни вещества и условия за растеж, необходими на микроорганизмите. Има различни компоненти на културалната среда като източник на енергия, източник на въглерод, източник на азот, минерали, микроелементи, вода, втвърдяващ агент и т.н. Оптималната температура, кислород и pH трябва да се регулират според вида на отглеждания микроорганизъм.
Има различни видове микробни култури; например партидно култивиране, непрекъснато култивиране, прободна култура, агарова култура, бульонна култура и др. Според състава на хранителната среда има различни видове хранителна среда, известни като синтетична среда, полусинтетична среда и естествена среда. Микробните култури се приготвят при стерилни условия в специална камера, наречена ламинарен въздушен поток. Средата за растеж и стъклените съдове се стерилизират преди инокулирането на желания микроорганизъм. При подходящи стерилни условия целевият микроорганизъм се прехвърля в стерилизираната хранителна среда и се инкубира при оптимална температура. В средата микроорганизмите ще растат и ще се размножават, използвайки предоставените хранителни вещества.
Фигура 3: Бактериална култура върху чиния
Каква е разликата между оцветяване по Грам и култура?
Оцветяване по Грам срещу култура |
|
| Щамът Grams е техника за диференциално оцветяване, използвана за бактериална диференциация и идентификация. | Микробната култура е метод за отглеждане на микроорганизми в лаборатория. |
| Компоненти | |
| Това използва различни реактиви, включително две оцветявания. | Това използва различни културни среди като твърди, полутвърди и течни среди, съставени от хранителни вещества и други необходими условия. |
| Основни функции | |
| Това позволява групиране на бактерии в две групи: грам отрицателни и грам положителни. | Това позволява размножаване на микроорганизми за различни цели. |
| Основа | |
| Резултатът от оцветяването по Грам се базира на разликите в пептидогликановия слой на клетъчната стена. | Микроорганизмите ще растат и ще се размножават в хранителната среда. |
| Резултат | |
| Грам отрицателните бактерии се виждат в розов цвят, а грам положителните бактерии се виждат в лилав цвят. | На плочите могат да се видят колонии от микроорганизми. В течна среда микроорганизмите са в суспендирана форма. |
Резюме – Оцветяване по грам срещу култура
Микробните култури се приготвят и поддържат в лабораторни условия за различни цели като съхранение, тестване, химическо пречистване и др. Оцветяването по Грам е процедура на оцветяване, която разграничава бактериите в две основни групи, наречени грам отрицателни бактерии и грам положителни бактерии. Следователно разликата между оцветяването по грам и културата е, че оцветяването по грам е техника за оцветяване на бактерии, докато културата е метод за отглеждане и поддържане на микроорганизми в лабораториите.
