Ключова разлика – CFU срещу MPN
Единица, образуваща колонии (CFU) и най-вероятно число (MPN) са два метода, използвани за изброяване на микроорганизми в проби. И двата параметъра се използват за откриване на качеството на водата и фекални индикаторни бактерии във водни проби. Единица, образуваща колония, е мярка, използвана за изброяване на броя на жизнеспособните бактериални клетки или гъбични клетки в специфичен обем или тегло на дадена проба. Стандартната единица за този параметър е CFU/ml или CFU/g. Най-вероятното число е друга единица, използвана за измерване на броя на жизнеспособните бактериални клетки в течна проба. Ключовата разлика между CFU и MPN е, че CFU се изчислява от бактериалните и гъбични колонии, растящи върху плоча с твърд агар, докато MPN се изчислява от жизнеспособни бактерии, растящи в течна среда.
Какво е CFU?
Единица, образуваща колония (CFU) е параметър, който измерва броя на жизнеспособните бактериални или гъбични клетки в дадена проба. Методът, който преброява единиците, образуващи колонии, се нарича стандартно броене на плочки. Жизнеспособните колонии, които се появяват върху агаровите плаки, се изразяват като CFU на 1 ml (единица, образуваща колония на милилитър) от пробата за течности или CFU на 1 g (единица, образуваща колония на един грам) от пробата за твърди вещества.йени
Има два общи метода, използвани за измерване на CFU в проба. Те са метод на разпръсната плоча и метод на изливане на плоча. Тези два метода се поддържат от техника, наречена серийно разреждане. Серийно разредените проби позволяват получаването на изброим брой колонии върху повърхността на агара. Известен обем проба може да се разпръсне върху повърхността на плоча с агар или да се смеси с агар и да се излее върху плоча. След това блюдото се инкубира и появилите се колонии се преброяват. Броят на колониите е свързан с броя на микроорганизмите в оригиналната проба. Плаките, които показват твърде много колонии или твърде малко колонии, се изключват от преброяването, тъй като резултатите може да не са статистически точни в тези блюда. Статистически най-добрият диапазон е 30 – 300 колонии върху агар. Следователно, правилните табели трябва да бъдат избрани за точно изброяване. За горната функция се извършва серийно разреждане.
След като преброите броя на жизнеспособните колонии в блюдата, CFU/ml може да се изчисли с помощта на следното уравнение.
CFU на ml от оригиналната проба=брой колонии в плоча X фактор на разреждане
Коефициент на разреждане=(1/ Разреждане на плаката)
Например, ако получите 149 колонии в плочата с разреждане 10-4, тогава броят на бактериите в 1 ml от оригиналната проба може да се изчисли, както следва:
CFU/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 или 1490000
=1. 49 x 106
Фигура 01: Единица за образуване на колонии
Какво е MPN?
Най-вероятният брой е алтернативна мярка на CFU/ml. MPN също оценява жизнеспособните клетки в течна проба. Той преброява организми, растящи в течна култура, и е предимно бактериологична техника. Този метод е особено полезен за проби, които съдържат ниски концентрации на бактериални клетки; например мляко, питейна вода и т.н. MPN стойността се изразява за 100 ml обем. MPN разчита на статистически метод, базиран на теория на вероятностите. Има статистически таблици, предназначени за намиране на MPN стойности за 100 ml от пробата. Тези таблици показват резултатите при 95% доверителни граници.
Стойността на MPN се изчислява след извършване на техника, наречена метод на многотръбна ферментация. Три комплекта епруветки, съдържащи подходяща културална среда, се инокулират с три различни обема на пробата като 10 ml, 1 ml и 0.1 ml и се инкубира за растежа. След инкубационния период епруветките се оценяват + (положително) или – (отрицателно) за наличие или отсъствие на растеж. След това моделът на положителните и отрицателните резултати се сравнява с MPN таблица на статистическите вероятности, за да се оцени броят на микроорганизмите. След това се дава MPN стойност за 100 ml от пробата. MPN се използва широко за откриване на колиформни бактерии, присъстващи във водни проби.
Фигура 02: MPN таблица
Каква е разликата между CFU и MPN?
CFU срещу MPN |
|
| CFU е мярка, използвана за изразяване на броя на жизнеспособните бактериални или гъбични колонии в дадена проба. | MPN е алтернативна мярка на CFU и измерва броя на жизнеспособните бактериални клетки в течна проба. |
| Единица | |
| CFU/ml или CFU/g | MPN/100 мл |
| Изчисляване | |
| CFU се изчислява чрез преброяване на броя на колониите, пораснали върху агарови плаки. | MPN се изчислява чрез сравняване на положителните и отрицателните модели на тръбите със статистическа таблица на MPN. |
| Техника на серийно разреждане | |
| Извършва се серийно разреждане преди поставяне на пробите върху агарови плаки. | Серийното разреждане обикновено не се извършва, когато се изчислява MPN |
| Методи | |
| Методът на разпръснатата плоча и методът на леещата плоча са два вида методи, които се изпълняват за получаване на CFU. | Ферментацията в множество тръби е методът, който се изпълнява за получаване на MPN стойност. |
Обобщение – CFU срещу MPN
Измерването на микробния растеж е необходимо по много причини. В предприятията за преработка на храни е необходимо да се измерва нивото и вида на микроорганизмите в храната. В хранително-вкусовата промишленост и медицината е необходимо да се гарантира, че стерилизиращите лечения се прилагат ефективно. В пречиствателните станции за отпадъчни води се изисква рутинно измерване на броя на микробите. Когато се оптимизира процедурата в молекулярната биология, е необходимо да се измери броят на колониите върху блюдата. Следователно има различни налични методи за изброяване и измерване на растежа. CFU и MPN са два такива метода, широко разпространени в различни области. CFU е мярка за броя на жизнеспособните бактериални и гъбични колонии, налични в дадена проба. Изчислява се с помощта на стандартен метод за броене на пластини или метод за жизнеспособно броене на пластини. MPN е друга мярка, която изразява броя на бактериалните клетки, присъстващи в даден обем от течната проба. Изчислява се с помощта на метода на многотръбна ферментация и MPN таблица. Това е разликата между CFU и MPN.
Изтеглете PDF версия на CFU срещу MPN
Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели според бележките за цитиране. Моля, изтеглете PDF версия тук Разлика между CFU и MPN.
