Ключовата разлика между йонообменната и изключващата хроматография по размер е, че йонообменната хроматография се използва за анализиране на йонни вещества според заряда, докато изключващата по размер хроматография се използва за анализиране на големи молекули според размера.
Хроматографията е аналитична техника, която може да се използва за анализиране на различни смеси. Хроматографските техники се наименуват според параметъра, използван за анализиране на веществата – напр. хроматография с изключване по размер, йонообменна хроматография и др.
Какво е йонообменна хроматография?
Йонообменната хроматография е аналитична техника, при която можем да анализираме йонни вещества. Често е полезно да се анализират неорганични аниони и катиони (т.е. хлоридни и нитратни аниони и калиеви, натриеви катиони). Въпреки че не е много разпространен метод, можем да анализираме органични йони с него. Освен това можем да използваме тази техника за пречистване на протеини, тъй като протеините са заредени молекули при определени стойности на pH. Тук използваме твърда неподвижна фаза, към която заредените частици могат да се прикрепят. Например, можем да използваме съполимери на смола полистирен-дивинилбензен като твърда подложка.
Фигура 01: Теория зад йонообменната хроматография
За да обясним това допълнително, стационарната фаза има фиксирани йони като сулфатни аниони или катиони на кватернерни амини. Всеки от тях трябва да се асоциира с противоположен йон (йон с противоположен заряд), ако искаме да запазим неутралността на тази система. Ако противоположният йон е катион, тогава наричаме системата катионобменна смола. Но ако противойонът е анион, системата е анионобменна смола. Освен това има пет основни стъпки в йонообменната хроматография:
- Начален етап
- Адсорбция на целта
- Начало на елуиране
- Край на елуирането
- Регенерация
Какво е хроматография с изключване на размера?
Хроматографията с изключване по размер или SEC е аналитична техника, при която молекулите в смес могат да бъдат разделени по техния размер и молекулно тегло. Обикновено работи с големи молекули, наречени макромолекули. Обикновено за анализа се използва воден разтвор. Тогава се нарича гел филтрационна хроматография. Когато е органичен разтворител, той се нарича гелпроникваща хроматография.
Гел филтрационната хроматография е форма на хроматография с изключване по размер, при която използваме воден разтвор като подвижна фаза. Следователно подвижната фаза, която често използваме в тази техника, е воден буфер. Освен това използваме хроматографска колона за това разделяне и трябва да напълним колоната с порести перли. Обикновено сефадексът и агарозата са полезни като порест материал. Следователно, тези материали са стационарната фаза на нашия експеримент. Освен това можем да използваме размера на порите на тези перли, за да определим размера на макромолекулите, които разделяме. Това обаче е само приблизителна оценка.
Фигура 02: Апарат за хроматография с изключване на размера
Гелпроникващата хроматография е форма на хроматография с изключване по размер, при която използваме органичен разтворител като подвижна фаза. Следователно можем да използваме разтвори като хексан и толуен за тази цел. Стационарната фаза е порест материал, същият като при гел филтрационната хроматография. Тази техника често се прилага за полимери и други органично разтворими материали. Методът на действие на техниката е подобен на този на гел филтрационната хроматография.
Каква е разликата между йонообменна и хроматография с изключване на размера?
Хроматографията е аналитична техника, която може да се използва за анализиране на различни смеси. Ключовата разлика между йонообменната и хроматографията с изключване на размера е, че йонообменната хроматография се използва за анализиране на йонни вещества според заряда, докато хроматографията с изключване на размера се използва за анализиране на големи молекули според размера.
Инфографиката по-долу дава повече информация за разликата между йонообменна и хроматография с изключване на размера.
Обобщение – Йонообмен срещу хроматография с изключване на размера
Хроматографията е аналитична техника, която може да се използва за анализиране на различни смеси. Ключовата разлика между йонообменната и хроматографията с изключване на размера е, че йонообменната хроматография се използва за анализиране на йонни вещества според заряда, докато хроматографията с изключване на размера се използва за анализиране на големи молекули според размера.
