Ключовата разлика между HEK293 и HEK293t е, че HEK293 е обезсмъртена клетъчна линия, получена от ембрионален човешки бъбрек, който е трансфектиран с отрязан човешки аденовирус тип 5DNA, докато HEK293t е дъщерна клетъчна линия, получена от HEK293 оригинална клетъчна линия, която е трансфектиран с плазмиден вектор, носещ SV40 източник на репликация.
Трансфекцията обикновено се определя като процес на въвеждане на чужда ДНК и РНК в клетките, за да се повлияе на техния генотип и фенотип. Такова въвеждане на чужди нуклеинови киселини чрез различни биологични, химични и физични методи може да промени свойствата на клетката. В крайна сметка това позволява изследването на генната функция и експресията на протеини в контекста на клетката. HEK293 и HEK293t са две клетъчни линии, които са широко използвани в изследванията на клетъчната биология в продължение на много години поради тяхната склонност към трансфекция.
Какво е HEK293?
HEK293 е обезсмъртена клетъчна линия, получена от ембрионален човешки бъбрек, който е трансфектиран с отрязан човешки аденовирус тип 5DNA, за да произведе много рекомбинантни протеини. HEK293 първоначално са изолирани от човешки бъбречни клетки от холандския биолог Алекс Ван дер Еб през 1973 г. Тези клетки са отгледани в тъканна култура от женски плод. По-късно те бяха трансфектирани с отрязан човешки аденовирус тип 5DNA от Франк Греъм, постдокторант в лабораторията на Ван дер Еб. Тази клетъчна линия беше наречена HEK293, защото беше 293rd експеримент на Франк.
Фигура 01: HEK293
Включването на аденовирусни гени в HEK клетъчния геном позволява на тези клетки да произвеждат голямо количество рекомбинантни протеини много ефективно. Освен това, аденовирусният вектор съдържа CMV промоторната област; следователно увеличава тази ефективност допълнително. Тази клетъчна линия е използвана като гостоприемник за изследвания на генната експресия. Тази клетъчна линия се използва и от биотехнологичната индустрия за производство на терапевтични протеини за генна терапия.
Какво е HEK293t?
HEK293t е дъщерна клетъчна линия, получена от оригиналната клетъчна линия HEK293, която е трансфектирана с плазмиден вектор, носещ SV40 произход на репликация, за да се произведе голямо количество рекомбинантни протеини. HEK293t е човешка клетъчна линия, която експресира мутантна версия на големия Т антиген SV40. HEK293t е създаден в лабораторията на Michele Carlos в Станфорд чрез стабилна трансфекция на клетъчната линия HEK29E с плазмид, кодиращ чувствителен към температура мутант на големия Т антиген SV40. Първоначално се споменава като 293/tsA1609neo. Това е така, защото трансфекцията се използва за създаване на клетъчна линия, която придава резистентност към неомицин и експресия на алела tsA 1609 на голям Т антиген SV40.
Фигура 02: HEK293t
Поради експресията на мутантна версия на SV40 голям Т антиген, трансфектираните плазмиди с SV 40 произход на репликация могат значително да увеличат количеството рекомбинантен протеин. Тази клетъчна линия обикновено се използва в биотехнологичната индустрия за експресия на протеини и производство на рекомбинантни ретровируси.
Какви са приликите между HEK293 и HEK293t?
- HEK293 и HEK293t са две клетъчни линии, които са широко използвани в изследванията на клетъчната биология поради тяхната склонност към трансфекция.
- И двете клетъчни линии са получени в лаборатория.
- Тези клетъчни линии могат значително да увеличат количеството производство на рекомбинантен протеин.
- Произвеждат се чрез трансфектиране на ембрионални човешки бъбречни клетки с плазмиден вектор.
Каква е разликата между HEK293 и HEK293t?
HEK293 е обезсмъртена клетъчна линия, получена от ембрионален човешки бъбрек, който е трансфектиран с отрязана ДНК на човешки аденовирус тип 5. Обратно, HEK293t е дъщерна клетъчна линия, получена от оригиналната HEK293 клетъчна линия, която е трансфектирана с плазмиден вектор, носещ SV40 произход на репликация. И така, това е ключовата разлика между HEK293 и HEK293t. Освен това, HEK293 не експресира мутантната версия на големия Т антиген SV40. От друга страна, HEK293t експресира мутантната версия на големия Т антиген SV40.
Следващата инфографика изброява разликите между HEK293 и HEK293t в таблична форма за едно до друго сравнение.
Резюме – HEK293 срещу HEK293t
HEK293 и HEK293t са две клетъчни линии, които са широко използвани в изследванията на клетъчната биология поради техния постоянен растеж и склонност към трансфекция. HEK293 е обезсмъртена клетъчна линия, получена от ембрионален човешки бъбрек, който е трансфектиран с отрязан човешки аденовирус тип 5DNA, докато HEK293t е дъщерна клетъчна линия, получена от HEK293 оригинална клетъчна линия, която е трансфектирана с плазмиден вектор, носещ SV40 произход на репликация. Така това обобщава разликата между HEK293 и HEK293t.