Ключовата разлика между оцветяването по Гимза и оцветяването по Лайшман е, че оцветяването по Гимза е полезно при оцветяването на ДНК региони на различни хромозоми за изследване на различни аберации като транслокации и пренареждания, докато оцветяването по Лайшман е полезно по време на оцветяване и анализ на кръвна натривка за разграничаване и идентифициране на трипанозоми, левкоцити и маларийни паразити.
Оцветяването е жизненоважна стъпка по време на подобряването на контраста на микроскопско изображение в контекста на микроскопията, особено за подчертаване на различни структури в биологични клетки и тъкани. Оцветяването на Гимза и оцветяването на Лейшман принадлежат към групата на оцветяването по Романовски, която включва също оцветяването по Райт и оцветяването по Дженър. Обикновено петната по Романовски са полезни при оцветяване на кръвни натривки. Ние използваме това главно по време на изследване на морфологията на червените кръвни клетки и представянето на диференциалното броене на белите кръвни клетки. Багрилата Eosin Y и Azure B са обичайните компоненти за оцветяването по Romanowsky. Процедурите за оцветяване по Романовски помагат при диагностицирането на различни болестни състояния като левкемия.
Какво е Giemsa Stain?
Оцветяването по Гимза обикновено помага да се направи разлика между цитоплазмената и ядрената морфология на кръвни клетки като бели кръвни клетки, червени кръвни клетки и тромбоцити. Освен това помага за разграничаване на паразитите. Основно се използва за цитогенетика и при диагностициране на малария и други паразитни заболявания. Освен това оцветяването по Гимза е специфично за фосфатните групи, които присъстват в ДНК. Те се придържат към областите, където има по-голям брой аденин-тиминови връзки в ДНК веригата.
Фигура 01: Гимза петно
Освен това, оцветяването по Гимза също е полезно при ивици по Гимза или G ленти за оцветяване на хромозоми и за генериране на кариограми. Следователно оцветяването по Гимза има способността да идентифицира и визуализира различни аномалии в хромозомите. Например, трофозоитът на Trichomonas vaginalis, който отделя зеленикав секрет и се състои от подвижни клетки върху мокри препарати, се оцветява с оцветяване на Giemsa. Както бе споменато по-горе, оцветяването по Гимза действа като типично петно от кръвен филм. При оцветяване червените кръвни клетки се оцветяват в розово, тромбоцитите се оцветяват в светло или бледо розово, а цитоплазмата на лимфоцитите, моноцитите и левкоцитите се оцветява съответно в небесносиньо, бледосиньо и магента.
Оцветяването по Гимза е смес от еозин, метиленово синьо и Azure B. Сместа от метиленово синьо, която образува еозинат заедно с метиленово синьо, стабилизира тази смес. В процеса на оцветяване по Гимза, тънък филм от пробата първо се поставя върху микроскопско предметно стъкло. Следващата стъпка е фиксиране с чист метанол за около 30 секунди чрез добавяне на няколко капки метанол върху предметното стъкло. След това предметното стъкло се потапя в 5% разтвор на оцветител по Гимза за около 20-30 минути. Последната стъпка е измиване на предметното стъкло с чешмяна вода и оставяне да изсъхне.
Какво е Leishman Stain?
Шотландският патолог Уилям Буг Лайшман е създателят на оцветяването на Лайшман. Това е едно от петната, които принадлежат към групата на петната по Романовски. Освен това, той се използва по-често при диференциацията и идентифицирането на различни маларийни паразити, трипанозоми – едноклетъчни флагелирани протозои, които са паразитни и левкоцити.
Фигура 02: Лейшман петно
Основата на оцветяването на Leishman е метанолова смес, която съдържа смес от метиленово синьо, което е „полихромирано“; деметилиран в различни видове азури и еозин. Поради стабилността на изходния разтвор на метаноловата смес, можем да го използваме директно за фиксиране на намазката, като същевременно елиминираме стъпката на предварително фиксиране. Стабилността намалява, ако разтворът се смеси с воден буфер. При извършване на диференциално преброяване на клетките, оцветяването на Лайшман осигурява характерен ярко виолетов цвят на ядрото и неутрофилните гранули. По този начин той засилва диференциацията между ядрото и цитоплазмата. Също така, оцветяването на Leishman осигурява по-качествено контрастно оцветяване в сравнение с други оцветители, които са базирани на метиленово синьо и еозин.
Тъй като различните цитоплазмени компоненти се обръщат строго към диференциацията и идентификацията, хематолозите предпочитат оцветяването по Лайшман в сравнение с другите оцветявания по Романовски. При откриването на маларийни паразити процедурите за оцветяване по Лайшман са по-чувствителни и точни от другите оцветявания, като оцветяването на Field.
Какви са приликите между оцветяването по Гимза и оцветяването по Лайшман?
- Оцветяването по Гимза и оцветяването по Лайшман са различни оцветявания.
- И двете са полезни при извършване на диференциално броене на белите кръвни клетки и изследване на клетъчната морфология на червените кръвни клетки.
- Освен това и двете петна принадлежат към групата на петната по Романовски.
Каква е разликата между оцветяването по Giemsa и оцветяването по Leishman?
Оцветяването по Гимза е полезно при оцветяването на ДНК региони на различни хромозоми за изследване на различни аберации като транслокации и пренареждания, докато оцветяването по Лайшман е полезно при оцветяване на кръв за диференциране и идентифициране на трипанозоми, левкоцити и маларийни паразити. И така, това е ключовата разлика между оцветяването на Гимза и оцветяването на Лайшман.
Освен това, бактериологът Густав Гимза разработи техниката за оцветяване по Гимза, докато патологът Уилям Буг Лайшман разработи техниката за оцветяване по Лайшман. Освен това, друга съществена разлика между оцветяването на Giemsa и оцветяването на Leishman е съставът на оцветяването. Оцветяването на Giemsa е смес от еозин, метиленово синьо и Azure B, докато оцветяването на Leishman е метанолова смес, която съдържа смес от метиленово синьо.
Резюме – Гимза Стейн срещу Лайшман Стейн
В контекста на микроскопията, техниките на оцветяване играят основна роля за подобряване на контраста на микроскопските изображения на различни биологични тъкани. Оцветяването по Гимза е полезно при оцветяването на ДНК региони на различни хромозоми за изследване на различни аберации като транслокации и пренареждания. Оцветяването на Leishman е полезно при оцветяване и анализ на кръвни натривки за разграничаване и идентифициране на трипанозоми, левкоцити и маларийни паразити. И така, това е разликата между оцветяването по Гимза и оцветяването по Лайшман.