Ключовата разлика между RIA и ELISA е, че радиоимунологичният анализ (RIA) е техника за имуноанализ, която използва радиоизотопи за откриване на комплекси антиген-антитяло, докато ензимно-свързаният имуноанализ (ELISA) е техника за имуноанализ, която използва ензими за откриване на антиген -комплекси на антитела.
Откриването на специфични протеини като антигени е изключително важно при диагностицирането на заболяването. Следователно RIA и ELISA са две техники за имуноанализ, използвани в лабораториите за бързо откриване на специфични протеини, особено антигени. Обикновено специфично антитяло се свързва с целевия антиген и образува видим комплекс, известен като преципитин. Тези антитяло и антигенни комплекси могат да бъдат идентифицирани чрез различни техники. Техниката за откриване на комплекса антиген-антитяло чрез използване на радиоизотопи е известна като RIA, а техниката за откриване на комплекса антиген-антитяло чрез използване на ензими е известна като ELISA.
Какво е RIA?
Радиоимуноанализ (RIA) е техника за имуноанализ, която открива комплекси от антиген и антитяло с помощта на радиоизотопи. Rosalyn Sussman Yalow разработва тази техника през 1960 г. с помощта на Соломон Берсън. За това забележително откритие Розалин Съсман Ялоу печели Нобелова награда за медицина през 1977 г. Обикновено при радиоимуноанализа известно количество от антиген първо се прави радиоактивен. Тази техника често използва гама-радиоактивни изотопи на йода, наречени 125-I, за маркиране антигени. Тези радиоизотопи обикновено се свързват с аминокиселината тирозин на антигена. След това радиомаркираният антиген се смесва с антитяло. В резултат на това радиомаркираният антиген и антитялото се свързват специфично едно с друго.
По-късно се добавя проба от серум, който съдържа неизвестно количество от същия антиген. Това кара небелязания антиген от серума да се конкурира с радиомаркирания антиген за местата за свързване на антитялото. С нарастването на концентрацията на небелязан антиген, повече от него се свързва с антитялото, измествайки радиомаркирания вариант. По този начин той намалява съотношението на радиомаркирания антиген, свързан с антитяло, към свободния радиомаркиран антиген. В края на процедурата свързаните антигени се отделят. В крайна сметка радиоактивността на свободните антигени в останалия супернатант се измерва с помощта на гама брояч.
Какво е ELISA?
ELISA е техника за имуноанализ, която открива комплекси от антиген и антитяло чрез използване на ензими. Това е биохимичен аналитичен анализ, описан за първи път от Engvall и Perlmann през 1971 г. В повечето прости форми на ELISA техники антигените на пробата на пациента са прикрепени към твърда повърхност. След това съответстващо антитяло се прилага върху повърхността, така че да може да се свърже с антигена.
Фигура 01: ELISA
Това конкретно антитяло е свързано с ензим. По-късно всички несвързани антитела се отстраняват чрез измиване с детергент. В последната стъпка на тази техника се добавя субстратът на ензима. Ако има правилно свързване на антиген и антитяло, последващата реакция произвежда откриваем цветен сигнал, най-често промяна на цвета.
Какви са приликите между RIA и ELISA?
- RIA и ELISA са техники за имуноанализ.
- И двете техники притежават образуване на комплекс от антиген и антитяло.
- Тези техники могат да се използват за откриване на неизвестни протеини в проби.
- И двете се използват при диагностика на заболявания в лаборатории.
- И двете са много специфични и чувствителни техники.
Каква е разликата между RIA и ELISA?
RIA е техника за имуноанализ за откриване на комплекса антиген-антитяло чрез използване на радиоизотопи. ELISA е техника за имуноанализ за откриване на комплекса антиген-антитяло с помощта на ензими. И така, това е ключовата разлика между RIA и ELISA. Освен това при RIA техниката антигенът се маркира, но при ELISA антитялото се маркира. Освен това, в RIA техниката, маркиращите молекули са радиоизотопи, докато в ELISA, маркиращите молекули са ензими. По този начин, това е друга разлика между RIA и ELISA.
Инфографиката по-долу показва повече разлики между RIA и ELISA в таблична форма.
Обобщение – RIA срещу ELISA
Имуноанализите играят много важна роля в различни биоаналитични настройки, като клинична диагностика, биофармацевтичен анализ, мониторинг на околната среда, биосигурност и тестване на храни. От 60-те години на миналия век е разработена широка гама от имуноанализи. RIA и ELISA са техники за имуноанализ. RIA е техника за имуноанализ за откриване на комплекс антиген-антитяло чрез използване на радиоизотопи. ELISA е техника за имуноанализ за откриване на комплекс антиген-антитяло чрез използване на ензими. Така това е обобщението на разликата между RIA и ELISA.
