Ключовата разлика между флуоресцентната микроскопия и конфокалната микроскопия е, че при флуоресцентната микроскопия целият образец се залива равномерно със светлина от източник на светлина, докато при конфокалната микроскопия само някои точки от образеца са изложени на светлина от източник на светлина.
Флуоресцентната микроскопия е важна аналитична техника, която е полезна при изследване на свойствата на органични или неорганични вещества. Конфокалната микроскопия е аналитична техника, полезна за увеличаване на оптичната разделителна способност и контраста на микроснимка с помощта на пространствена дупка за блокиране на нефокусирана светлина при формирането на изображението.
Какво е флуоресцентна микроскопия?
Флуоресцентната микроскопия е важна аналитична техника, която е полезна при изследване на свойствата на органични или неорганични вещества. Инструментът, който използваме за това измерване, е флуоресцентен микроскоп. Това е вид оптичен микроскоп. Този тип оптичен микроскоп използва флуоресценция вместо разсейване, отражение, затихване и абсорбция или в допълнение към тях.
Флуоресцентният микроскоп използва флуоресценция за генериране на изображение. Може да е проста настройка като епифлуоресцентен микроскоп или по-сложен дизайн, включително конфокален микроскоп, който използва оптично сечение. Това помага за получаване на по-добра разделителна способност на флуоресцентното изображение.
Фигура 01: Флуоресцентен микроскоп
Когато разглеждаме принципа на флуоресцентната микроскопия, трябва да използваме образеца за осветяване със светлина с определена дължина на вълната. Там екземплярът абсорбира светлина от флуорофори, което ги кара да излъчват светлина с по-дълги дължини на вълната. Важно е да се отдели осветената светлина от много по-слабо излъчваната флуоресценция чрез използването на филтър за спектрални емисии.
Обикновено флуоресцентният микроскоп съдържа източник на светлина, възбуждащ филтър, дихроично огледало и емисионен филтър. Източникът на светлина може да бъде ксенонова дъгова лампа, лампа с живачни пари, светодиоди и лазери. Дихроичното огледало е известно още като дихроичен лъчеделител.
Какво е конфокална микроскопия?
Конфокалната микроскопия е аналитична техника, полезна за увеличаване на оптичната разделителна способност и контраста на микроснимка с помощта на пространствена дупка за блокиране на нефокусирана светлина при формирането на изображението. Известен е също като конфокална лазерна сканираща микроскопия или лазерна конфокална сканираща микроскопия. Това е техника за оптично изобразяване.
При тази микроскопична техника, заснемането на множество 2D изображения на различни дълбочини в проба дава възможност за реконструкция на 3D структури в обект. Конфокалната микроскопска техника е широко полезна в научните и индустриални общности. Обикновено се използва в науките за живота, проверката на полупроводниците и науката за материалите.
Фигура 02: Принципът на сензора за конфокална точка от патента на Minsky
По време на процеса светлината преминава през пробата под конвенционален микроскоп толкова навътре в пробата, колкото може да проникне, докато конфокален микроскоп, който фокусира само по-малък лъч светлина, преминава през тясно ниво на дълбочина наведнъж. Тази техника е разработена от Марвин Мински през 1957 г.
Каква е разликата между флуоресцентна микроскопия и конфокална микроскопия?
Флуоресцентната микроскопия е важна аналитична техника, която е полезна при изследване на свойствата на органични или неорганични вещества. Конфокалната микроскопия е аналитична техника, полезна за увеличаване на оптичната разделителна способност и контраста на микроснимка с помощта на пространствена дупка за блокиране на нефокусирана светлина при формирането на изображението. Ключовата разлика между флуоресцентната микроскопия и конфокалната микроскопия е, че при флуоресцентната микроскопия целият образец се залива равномерно в светлина от светлинен източник, докато при конфокалната микроскопия само някои точки от образеца са изложени на светлина от светлинен източник.
Инфографиката по-долу представя разликите между флуоресцентната микроскопия и конфокалната микроскопия в таблична форма за сравнение едно до друго.
Обобщение – Флуоресцентна микроскопия срещу конфокална микроскопия
Флуоресцентната микроскопия и конфокалната микроскопия са две аналитични техники, включени в оптичните изображения. Ключовата разлика между флуоресцентната микроскопия и конфокалната микроскопия е, че при флуоресцентната микроскопия целият образец се залива равномерно в светлина от светлинен източник, докато при конфокалната микроскопия само някои точки от образеца са изложени на светлина от светлинен източник.
