Ключовата разлика между общия брой клетки и броя на жизнеспособните клетки е, че общият брой клетки оценява всички клетки, включително живи и мъртви микробни клетки в проба, докато броят на жизнеспособните клетки оценява само живите микробни клетки в пробата.
Преброяването на броя на организмите в една популация се счита за необходимо за повечето експериментални работи. Ето защо ние се опитваме да анализираме броя на микробите в проба, като използваме директни и косвени методи. Директните измервания включват методи, които преброяват директно броя на клетките. Косвените измервания включват измерване на някакъв параметър, който може да бъде свързан с броя на клетките, като плътност на клетките, сухо тегло и др. Някои методи определят количествено само живите микробни клетки в пробата. Броят на жизнеспособни клетки е един такъв метод. Директното микроскопско преброяване определя количествено всички клетки в известен обем среда/проба с помощта на микроскоп. Следователно той брои както живи, така и мъртви клетки. Това е вид общ брой клетки.
Какво е общ брой клетки?
Общият брой клетки е метод, който включва преброяване на всички клетки в известен обем среда/проба с помощта на микроскоп и камера за броене (хемоцитометър). За разлика от броя на жизнеспособните клетки, се броят както живите, така и мъртвите клетки. Следователно, това е общ брой, освен ако по време на наблюдението не е приложено оцветяване за жизнеспособност. При микроскопията клетките се наблюдават директно под микроскоп и се преброяват. Той използва клетъчна суспензия, която се състои от микробни клетки. За по-лесно броене и точни измервания може да се направи разреждане на пробата. При много високи/ниски концентрации на клетки получаването на общия брой клетки с помощта на микроскоп е трудна задача.
Фигура 01: Камера за броене – хемоцитометър
Камерите за броене са лесни, евтини и бързи за общо преброяване на клетките. Най-важното е, че камерите за броене са полезни за броене както на еукариоти, така и на прокариоти. Ние преброяваме клетките в избрани квадрати с известен обем, за да определим общия брой клетки.
Какво е брой жизнеспособни клетки?
Броят на жизнеспособни клетки е метод за преброяване на живи микробни клетки в проба. Той брои само живи клетки в пробата. Броят на жизнеспособни плочи, мембранната филтрация и най-вероятният брой са няколко техники за броене на жизнеспособни клетки. Тези подходи се основават на растежа. Методът за преброяване на жизнеспособни плаки е мощен метод, използван в много микробиологични области, включително микробиология на храните и млечните продукти, медицинска микробиология, микробиология на околната среда, микробна генетика, развитие на растежни среди и биотехнологии.
Най-често срещаният начин за преброяване на жизнеспособни бактерии е да се използва проба, способна да образува колонии върху агарна среда. Има два основни начина за извършване на броене на плоча: техника на разпръскване на плоча и техника на изливане на плоча. Известен обем от пробата може или да се разпръсне върху повърхността на агаровата плака, или да се смеси с агара. След това блюдото се инкубира и появилите се колонии се преброяват. Броят на колониите е свързан с броя на микроорганизмите в оригиналната проба. Броят на жизнеспособните измерва само онези клетки, които са живи и растат.
Фигура 02: Брой жизнеспособни пластини
Най-вероятният брой (MPN) е алтернатива на методите за преброяване на плаките за оценка на гъстотата на популацията на жизнеспособни клетки. Той преброява организми, растящи в течна култура и следователно е предимно бактериологична техника. Той е особено полезен за ниски концентрации на организми, напр. мляко, питейна вода.
Техниката за мембранна филтрация е по-подходяща, когато микробите са много разредени, както в градското водоснабдяване. Това се прави просто чрез преминаване на известен обем течност през филтър и инкубиране върху хранителна среда. Колониите, които се развиват върху филтъра, се преброяват и бактериите на милилитър от пробата се изчисляват.
Какви са приликите между общия брой клетки и броя на жизнеспособните клетки?
- Общият брой клетки и броят на жизнеспособните клетки са два вида микробни техники, които определят количествено клетките.
- Те са често използвани техники за изброяване в микробиологичните лаборатории.
Каква е разликата между общия брой клетки и броя на жизнеспособните клетки?
Общият брой клетки изброява всички живи и мъртви микробни клетки в проба. Обратно, броят на жизнеспособните клетки изброява само живите клетки в пробата. И така, това е ключовата разлика между общия брой клетки и броя на жизнеспособните клетки. Общият брой клетки не зависи от растежа на колониите върху агаровите плочи, докато броят на жизнеспособните клетки е техника, базирана на растежа и зависи от растежа на микробните колонии върху агаровите плочи.
Информационната графика по-долу обобщава разликата между общия брой клетки и броя на жизнеспособните клетки.
Резюме – Общ брой клетки спрямо брой жизнеспособни клетки
Общият брой на клетките изброява както живите, така и мъртвите микробни клетки, докато броят на жизнеспособните клетки изброява само живите клетки. По този начин, това е ключовата разлика между общия брой клетки и броя на жизнеспособните клетки. Освен това броят на жизнеспособните клетки е техника, базирана на растежа, за разлика от общия брой клетки. Освен това изисква инкубация на плочите до получаване на видимите колонии. Преброяване на жизнеспособни плочки, MPN и мембранна филтрация са няколко техники за преброяване на жизнеспособни клетки, докато директната микроскопия и използването на хемоцитометър са две техники за общ брой клетки.