Ключовата разлика между изолирането на ДНК и РНК е, че изолирането на ДНК е процедура, при която вид нуклеинова киселина, наречена ДНК, се извлича от биологична клетка, докато изолирането на РНК е процедура, при която се извлича вид нуклеинова киселина, наречена РНК извлечен от биологична клетка.
Изолирането на нуклеинова киселина е отправната точка в широк набор от приложения надолу по веригата. Високото качество на нуклеиновите киселини в изходните проби е ключов фактор за успеха на последващите приложения надолу по веригата. Изолирането на нуклеинова киселина може да се дефинира като поредица от стъпки за получаване на нуклеинова киселина в проба с чистота, която може да се използва за различни стъпки на приложение надолу по веригата. Целта на екстракцията на нуклеинова киселина е да се разпадне клетъчната мембрана и да се постигне максимално елиминиране на липидите и протеините, за да се получат чисти нуклеинови киселини като ДНК или РНК.
Какво е изолиране на ДНК?
Изолирането на ДНК е рутинна процедура, при която вид нуклеинова киселина, наречена ДНК, се извлича от биологична клетка. Изолирането на ДНК се извършва чрез извличане на ДНК от кръв, замразени тъканни проби и парафинови тъканни блокове. Има три основни стъпки в изолирането на ДНК, включително клетъчен лизис, извличане на ДНК и утаяване. При клетъчен лизис клетките в пробата се отделят една от друга често чрез физически средства като смилане или завихряне и се поставят в разтвор, съдържащ сол. Обикновено положително заредените натриеви йони в солта помагат за защитата на отрицателно заредените фосфатни групи, които се движат по протежение на гръбнака на ДНК. По-късно се добавя детергент за разграждане на липидите в клетъчната мембрана и ядра, които освобождават ДНК, тъй като тези мембрани се разрушават.
Фигура 01: Изолиране на ДНК
Извличането на ДНК се извършва, за да се получи чиста проба от ДНК. Често се добавя протеазен ензим за разграждане на свързаните с ДНК протеини и други клетъчни протеини. Освен това някои от клетъчните остатъци могат да бъдат отстранени чрез филтриране на пробата. Накрая, ДНК се утаява с помощта на алкохол. Освен това, ако има много ДНК, може да се наблюдава оскъдна бяла утайка в края на процедурата.
Какво е изолиране на РНК?
Изолирането на РНК е процедура, при която вид нуклеинова киселина, наречена РНК, се извлича от биологична клетка. Тази процедура често се усложнява от наличието на рибонуклеазни ензими в клетките и тъканите, които разграждат РНК. В молекулярната биология се използват няколко метода за изолиране на РНК от проби, като екстракция с гуанидиний-тиоцианат-фенол-хлороформ.
Фигура 02: Изолиране на РНК
Изолирането на РНК обикновено се състои от няколко стъпки, включително клетъчен лизис и хомогенизиране, спиране на биохимичните процеси, разделяне на нуклеинова киселина, извличане на РНК, грубо пречистване и оценка на качеството на РНК. Методът на лизис и елуиране, базиран на филтърна хартия, има висок капацитет на извличане на РНК. Освен това екстракцията на РНК в течен азот с помощта на хаванче и пестик също е много полезен метод, тъй като предотвратява активността на рибонуклеазата.
Какви са приликите между изолирането на ДНК и РНК?
- Изолирането на ДНК и РНК са два вида процедури за изолиране на нуклеинова киселина.
- И двете процедури имат подобни основни стъпки, като клетъчен лизис, екстракция и пречистване.
- Тези процедури изолират важни видове нуклеинови киселини, които имат редица приложения надолу по веригата.
- Извършват се в лабораторни условия.
- Могат да бъдат изпълнени с помощта на произведени комплекти.
Каква е разликата между изолирането на ДНК и РНК?
При изолиране на ДНК вид нуклеинова киселина, наречена ДНК, се извлича от биологична клетка, докато при изолиране на РНК вид нуклеинова киселина, наречена РНК, се извлича от биологична клетка. По този начин това е ключовата разлика между изолирането на ДНК и РНК. Освен това, изолирането на ДНК обикновено се извършва при около рН 7 до 8, докато изолирането на РНК обикновено се извършва при около рН 4,5.
Инфографиката по-долу представя разликите между изолирането на ДНК и РНК в таблична форма за сравнение едно до друго.
Обобщение – изолиране на ДНК срещу РНК
Изолирането на ДНК и РНК са два вида процедури за изолиране на нуклеинова киселина. Изолирането на ДНК е процедура, по време на която се извлича ДНК от биологична клетка. Изолирането на РНК е процедура, по време на която РНК се извлича от биологична клетка. И така, това е ключовата разлика между изолирането на ДНК и РНК.
