Ключовата разлика между радиоимуноанализа и имунорадиометричен анализ е, че при радиоимунологичния анализ пробата или съединението, което трябва да се измери, се комбинира с радиоактивен антиген преди комбинацията, докато при имунорадиометричния анализ пробата или съединението веднага се комбинира с радиомаркирания антитела.
Имуноанализът е биохимичен тест, който открива наличието или концентрацията на макромолекули в разтвор с помощта на антитяло или антиген. Флуоресцентни и радиоактивни антитела се използват за измерване на антигени в проба. Първоначално антителата се използват в техники за утаяване като имунопреципитация, имунодифузия и имунна електрофореза за анализ на серумен протеин. Понастоящем се използват високочувствителни техники като радиоимуноанализ и имунорадиометрични анализи за измерване на лекарства, туморни маркери и хормони.
Какво е радиоимуноанализ?
Радиоимуноанализ (RIA) е имуноанализ, който използва поетапно образуване на радиоактивни елементи от комплекси антиген-антитяло. RIA обикновено използва радиоактивни антитела за откриване на количеството антиген в проба. RIA е много специфичен и силно чувствителен in vitro анализ. Принципът зад АРВ е обвързване на конкуренцията. Тук радиоактивен антиген се конкурира с нерадиоактивен антиген за постоянно количество антитяло или рецепторни свързващи места. RIA изисква специално лицензиране и предпазни мерки, тъй като се използват радиоактивни вещества, и остава сред най-евтините техники.
Фигура 01: Имуноанализ
По време на RIA, известно количество антиген често се прави радиоактивен чрез маркиране с гама-радиоактивни изотопи на йод, прикрепен към тирозин. След това този антиген се комбинира с известно количество антитяло. Тук антигенът и антитялото се свързват специфично едно с друго. След това се добавя проба от кръвен серум, за да се инициира конкурентна реакция между белязаните антигени и небелязаните антигени в серума със специфични антитела. При тази реакция антителата освобождават определено количество белязан антиген. Това количество е пропорционално на съотношението на белязан към небелязан антиген. Накрая се генерира крива на свързване, за да се извлече количеството антиген в кръвния серум на пациента.
Какво е имунорадиометричен анализ?
Имунорадиометричният анализ (IRMA) е имуноанализ, който използва радиомаркирани антитела. В IRMA антителата се маркират с радиоизотопи. Тези антитела се свързват с антигените, присъстващи в специфична проба. В положителна проба антителата, които са радиоактивно белязани, се свързват със свободните епитопи на антигените. Това образува комплекс антиген-антитяло.
По време на втората реакция, белязаните антитела, които не са свързани, се отстраняват с помощта на антиген в твърда фаза. Оставащият брой радиоактивни антитела в разтвора е пряка функция на концентрацията на антигена. IRMA е известен като анализ на излишък от реагент, при който като реагент се използва излишък от радиомаркирано антитяло. Тук е позволено да реагира свръхконцентрация на белязано антитяло или антиген. Като последна стъпка антиген-свързаните и свободните антитела се разделят и антиген-свързаната фракция се подлага на радиоактивни анализи. Тук активността на фракцията е право пропорционална на концентрацията на антигена.
Какви са приликите между радиоимунологичния и имунорадиометричния анализ?
- И радиоимуноанализът, и имунорадиометричният анализ са имуноанализи, които използват радиоактивни елементи при поетапното образуване на комплекси антиген-антитяло.
- Те образуват комплекс антиген-антитяло.
Каква е разликата между радиоимуноанализа и имунорадиометричен анализ?
Радиоимуноанализът е имуноанализ, който определя нивата на антитела чрез антиген, белязан с радиоизотоп, докато имунорадиометричният анализ е анализ на излишък от реагент, който използва свръхконцентрация на радиомаркирано антитяло. По този начин това е ключовата разлика между радиоимуноанализа и имунорадиометричен анализ. IRMA е в състояние да осигури по-висока чувствителност от RIA. При RIA антигените се маркират с гама-радиоактивни изотопи на йода, докато в IRMA антителата се маркират с помощта на изотопи на йода. Така че това също е разлика между радиоимуноанализ и имунорадиометричен анализ. Тъй като IRMA е техника с излишен реагент, анализът се извършва за по-кратко време от RIA.
Следващата таблица обобщава разликите между радиоимуноанализа и имунорадиометричен анализ.
Обобщение – Радиоимуноанализ срещу имунорадиометричен анализ
Радиоимуноанализът е имуноанализ, който използва радиоактивни елементи в поетапно образуване за определяне на нивата на антитела. RIA обикновено използва радиоактивни антитела. Радиоактивен антиген се конкурира с нерадиоактивен антиген за постоянно количество антитяло или рецепторни свързващи места. Имунорадиометричният анализ е имуноанализ, провеждан за определяне на нивата на антиген в проба, като се използват радиомаркирани антитела. Тези антитела се свързват с антигени, присъстващи в специфична проба. В края на всеки анализ се образува комплекс антиген-антитяло. За да се получат резултатите от анализите, се чертае крива на свързване. При радиоимуноанализа количеството на белязания антиген е пропорционално на съотношението на белязания към небелязания антиген, но в имунорадиометричния анализ активността на антигенно свързаната фракция е право пропорционална на концентрацията на антигена. Това е обобщението на разликата между радиоимуноанализ и имунорадиометричен анализ.
