Ключовата разлика между дрожди един хибрид и дрожди два хибрида е, че дрожди един хибрид е in vitro базиран анализ за анализ на взаимодействията ДНК-протеин, докато дрожди два хибрида е in vitro базиран анализ за анализиране на протеин-протеинови взаимодействия.
Изучаването на взаимодействията между клетъчните молекули може да помогне да се определят местата за разпознаване, участващи в генната експресия и протеиновите пътища. ДНК и протеиновите взаимодействия са неразделна част от клетъчните процеси като модификации на ДНК и транскрипционна регулация и др. От друга страна, протеиновите и протеиновите взаимодействия играят жизненоважна роля в клетъчните процеси като репликация, транскрипция, транслация и сигнална трансдукция. Следователно е изключително важно да се идентифицират тези взаимодействия на клетъчните молекули чрез различни анализи. Дрожди един хибрид и дрожди два хибрида са два in vitro базирани анализа за анализ на взаимодействията ДНК-протеин и протеин-протеин.
Какво е Yeast One Hybrid?
Yeast one hybrid (Y1H) е in vitro базиран анализ за анализиране на вътреклетъчните ДНК-протеинови взаимодействия. Този метод е създаден за първи път от Wang и Reed през 1993 г. Оттогава той показва по-голяма сила в биологичните изследвания. В този анализ има два основни компонента: ДНК стръв и протеинова плячка.
Фигура 01: Yeast One Hybrid
При процедурата ДНК последователност (ДНК примамка) първо се клонира преди два различни репортера (HIS3, LacZ). Тези репортерни конструкции са интегрирани в генома на щам дрожди. Транскрипционните фактори се приемат като протеинова плячка. Транскрипционните фактори се сливат с домена за транскрипционно активиране (AD) на дрождения Gal4 транскрипционен фактор, за да се направят хибридни протеини. Целият този хибриден протеин се интегрира в плазмид, преди да бъде въведен в щама на дрождите. След въвеждането на рекомбинантния плазмид, когато транскрипционният фактор взаимодейства с ДНК фрагмента, AD частта активира експресията на репортерния ген (HIS3 или LacZ). Секвенирането на плазмидите позволява идентифицирането на транскрипционния фактор, който може да се свърже с ДНК фрагмента. Наскоро хибридният метод на дрождите беше използван за изследване на диагнозата на заболяването. Следователно в бъдеще този анализ ще се използва по-широко в научни изследвания и медицински лечения.
Какво е Yeast Two Hybrid?
Yeast two hybrid (Y2H) е in vitro базиран анализ за анализ на вътреклетъчния протеин и протеиновите взаимодействия. Този метод първоначално е открит от Стенли Фийлдс и Ок-Кю Сонг през 1989 г. Тази техника открива протеин-протеинови взаимодействия с помощта на Gal4 транскрипционния фактор на дрождите.
Фигура 02: Дрожди два хибрида
При този метод първо се конструират две сливания (хибриди), като се използват представляващи интерес протеини: сливане на единия протеин с ДНК свързващ домен (DBD) и чрез сливане на другия протеин с активаторния домен (AD) на Gal4 транскрипционния фактор. Протеинът, слят с DBD, е известен като стръв, докато протеинът, слят с AD, е известен като плячка. В щама на дрождите, при взаимодействието на стръвта и плячката, DBD и AD се приближават, за да генерират функционален Gal4 транскрипционен фактор нагоре по веригата на репортерния ген. Функционалният транскрипционен фактор активира експресията на репортерен ген. Освен това този метод в момента се използва за скрининг на взаимодействията на интегрални мембранни протеини в клетки на бозайници.
Какви са приликите между Yeast One Hybrid и Yeast Two Hybrid?
- Дрожди един хибрид и дрожди два хибрида са два in vitro базирани анализа за анализиране на ДНК-протеин и протеин-протеин взаимодействия.
- Тези анализи използват щамове дрожди.
- И двата анализа използват домейна на активиране (AD) на Gal4 транскрипционния фактор.
- Те използват експресия на репортерен ген (HIS3 или LacZ) за откриване на взаимодействия.
- Те имат стръв и плячка.
- И двата анализа са много полезни в съвременните биологични изследвания.
Каква е разликата между Yeast One Hybrid и Yeast Two Hybrid?
Yeast one hybrid е in vitro базиран анализ за анализиране на ДНК и протеинови взаимодействия, докато yeeast two hybrid е in vitro базиран анализ за анализ на протеини и протеинови взаимодействия. По този начин, това е ключовата разлика между дрожди един хибрид и дрожди два хибрида. Освен това, при един хибрид от дрожди стръвта е ДНК фрагмент, а плячката е протеинова молекула. От друга страна, в дрождите два хибрида, и примамката, и плячката са протеинови молекули.
Инфографиката по-долу изброява разликите между дрожди един хибрид и дрожди две хибриди в таблична форма за сравнение едно до друго.
Обобщение – Yeast One Hybrid срещу Yeast Two Hybrid
Дрожди един хибрид и дрожди два хибрида са два важни in vitro базирани анализа. Дрожди един хибрид е in vitro базиран анализ за анализиране на ДНК и протеинови взаимодействия, докато дрожди два хибрида е in vitro базиран анализ за анализиране на протеини и протеинови взаимодействия. По този начин, това е ключовата разлика между дрожди един хибрид и дрожди две хибриди.
