Ключовата разлика между pBR322 и pUC19 е, че pBR322 е плазмиден вектор с дължина 4361 базови двойки, докато pUC19 е плазмиден вектор с дължина 2686 базови двойки.
Векторът за клониране е малка част от ДНК, която може да се поддържа стабилно в организма. Това също е малка част от ДНК, в която може да се вмъкне чужд ДНК фрагмент за целите на клонирането. Векторът съдържа важни характеристики, които позволяват удобното вмъкване на чужд ДНК фрагмент във вектори, като рестрикционни сайтове, избираем маркер, репортерен ген и елемент на експресия. Клонирането е извършено за първи път с помощта на E.коли. Клониращите вектори за E. coli включват плазмиди, бактериофаги, козмиди и бактериални изкуствени хромозоми (BAC). Най-често използваните вектори са генетично модифицирани плазмиди. pBR322 и pUC19 са два вида плазмидни вектори.
Какво е pBR322?
pBR322 е плазмиден вектор. Това е един от първите широко използвани вектори за клониране на E. coli. Този вектор е създаден за първи път през 1977 г. в лабораторията на Хърбърт Бойер в Калифорнийския университет в Сан Франциско. Това е кръгова двойноверижна ДНК с дължина 4361 базови двойки.
Фигура 01: pBR322
Този плазмиден вектор има специални характеристики. Обикновено той има два гена за резистентност към антибиотици: ген bla, кодиращ резистентност към ампицилин (AmpR) протеин и ген tetA, кодиращ резистентност към тетрациклин (TetR) протеин. Освен това, той съдържа произхода на репликацията на pMB1. Този плазмиден вектор също има rop ген, който кодира ограничител на броя на плазмидните копия. Освен това, този вектор има уникални рестрикционни места за повече от 40 рестрикционни ензима. Единадесет от тези четиридесет рестрикционни места се намират в TetR ген. Има две рестрикционни места за рестрикционните ензими HindIII и ClaI в промотора на TetR гена. Освен това има шест много важни рестрикционни места в гена AmpR. pBR322 е вектор за клониране с нисък брой копия. Той осигурява приблизително 20 плазмидни копия на бактериална клетка. Молекулното тегло на вектора е 2,83×106 далтона.
Какво е pUC19?
pUC19 е плазмиден вектор с дължина 2686 базови двойки. Това е един от серията плазмидни вектори, създадени от Joachim Messing и сътрудници. Ранната работа върху тази плазмидна серия е проведена в Калифорнийския университет. Това е кръгова двойноверижна ДНК.
Фигура 02: pUC19
Този плазмиден вектор също съдържа важни характеристики. Той има N терминален фрагмент от гена на β-глактозидаза (lacz). Той също така има регион с множество сайтове за клониране (MCS). Този регион е разделен на кодони 6 и 7 на lacz гена. MCS регионът осигурява много рестрикционни сайтове за рестрикционни ендонуклеази. В допълнение към β-глактозидазния ген, pUC19 също кодира ген за резистентност към ампицилин (AmpR). Освен това, произходът на репликацията се извлича от плазмид pMB1. Въпреки че pUC19 е малък по размер, той има голям брой копия (500-700 копия на бактериална клетка). Молекулното тегло на този плазмиден вектор е 1,75×106 далтона.
Какви са приликите между pBR322 и pUC19?
- pBR322 и pUC19 са два вида плазмидни вектори.
- Те са популярни вектори за клониране на coli.
- И двата плазмидни вектора имат една и съща форма на произход на репликация на плазмид pMB1.
- Тези вектори имат множество рестрикционни сайтове.
- И двата плазмидни вектора имат ген за устойчивост на ампицилин като избираем маркер.
Каква е разликата между pBR322 и pUC19?
pBR322 е плазмиден вектор с дължина 4361 базови двойки, докато pUC19 е плазмиден вектор с дължина 2686 базови двойки. По този начин, това е ключовата разлика между pBR322 и pUC19. Освен това pBR322 е плазмиден вектор с нисък брой копия, докато pUC19 е плазмиден вектор с висок брой копия.
Инфографиката по-долу представя разликите между pBR322 и pUC19 в таблична форма за сравнение едно до друго.
Резюме – pBR322 срещу pUC19
Най-често използваните клониращи вектори за E.coli са генетично модифицирани плазмиди.pBR322 и pUC19 са два вида плазмидни вектори. pBR322 е плазмиден вектор с дължина 4361 базови двойки, докато pUC19 е плазмиден вектор с дължина 2686 базови двойки. И така, това е ключовата разлика между pBR322 и pUC19.
