Ключовата разлика между имунопреципитацията и коимунопреципитацията е, че имунопреципитацията е техника, която утаява протеин от разтвора с помощта на специфично антитяло, докато коимунопреципитацията е техника, която утаява непокътнати протеинови комплекси от разтвора с помощта на специфично антитяло.
Взаимодействието антиген-антитяло е специфично химично взаимодействие между антитела, произведени от В-клетки и антигени (протеини) по време на имунна реакция. Обикновено разтворимите антигени се комбинират с разтворими антитела в присъствието на електролит при разтворима температура и рН, за да направят неразтворим видим комплекс. Това се нарича реакция на утаяване. Следователно имунопреципитацията и коимунопреципитацията са два вида реакции на утаяване, които се използват рутинно в лабораториите за идентифициране на протеини като антигени.
Какво е имунопреципитация?
Имунопреципитацията е техника за утаяване на протеин от разтвор с помощта на специфично антитяло. Понякога тази техника е известна също като индивидуална протеинова имунопреципитация. Имунопреципитацията използва антитяло за изолиране на избран протеин от интерес от клетъчен лизат. Антитялото пречиства своя специфичен целеви протеин или антиген от смес. Антитялото се свързва с протеина и комплексът антитяло-антиген се изтегля от пробата. В експерименталната настройка комплексът антиген-антитяло се изтегля с помощта на протеин A/G свързана агароза или магнитни перли. По-късно зърната се промиват и представляващият интерес протеин се елуира. Пречистеният протеин или антиген, получен чрез имунопреципитация, се проверява чрез различни техники като ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA) и Western blot (WB).
Фигура 01: Имунопреципитация
Освен това, изолирани протеини или антигени могат да бъдат количествено определени и идентифицирани чрез масспектрометрия чрез използване на ензимни модели на смилане, базирани на първичната последователност. Има определени съображения, преди да започнете експеримент за имунопреципитация: избор на формат на метода, свързващи протеини и гранули, избор на правилното първично антитяло и изотип и отрицателна контрола.
Какво е коимунопреципитация?
Коимунопреципитацията е техника за утаяване на непокътнати протеинови комплекси от разтвора с помощта на специфично антитяло. Коимунопреципитацията обикновено работи чрез избиране на специфично антитяло, което е насочено към известен протеин (антиген), за който се смята, че е член на по-голям комплекс от протеини. Чрез насочване към известния член със специфично антитяло е възможно да се изтегли целият протеинов комплекс от разтвора. Това позволява идентифицирането на неизвестните членове на комплекса. Концепцията за изтегляне на протеинови комплекси от разтвора понякога се нарича механизъм „издърпване надолу“.
Фигура 02: B Коимунопреципитация
Коимунопреципитацията е мощна техника, която се използва за анализ на взаимодействията протеин-протеин. Основната цел на коимунопреципитацията е идентифицирането на взаимодействащи партньори като лиганди, кофактори или сигнални молекули към протеина, който представлява интерес. Освен това коимунопреципитацията е ефективна техника, която се използва за отделяне на протеини от серум, клетъчен лизат, хомогенизирана тъкан или кондиционирана среда.
Какви са приликите между имунопреципитация и коимунопреципитация?
- Имунопреципитацията и коимунопреципитацията са два вида техники, базирани на реакция на утаяване.
- И двете техники могат да се използват за идентифициране на прицелен антиген чрез специфично антитяло.
- И двете техники силно зависят от взаимодействието антиген-антитяло.
- Те се използват рутинно в клиничните лаборатории.
Каква е разликата между имунопреципитация и коимунопреципитация?
Имунопреципитацията е техника, която утаява протеин от разтвора с помощта на специфично антитяло, докато коимунопреципитацията е техника, която утаява непокътнати протеинови комплекси от разтвора с помощта на специфично антитяло. По този начин, това е ключовата разлика между имунопреципитация и коимунопреципитация. Освен това имунопреципитацията се използва по-често в лаборатории, докато коимунопреципитацията не се използва често в лаборатории.
Инфографиката по-долу представя разликите между имунопреципитация и коимунопреципитация в таблична форма за сравнение едно до друго.
Обобщение – Имунопреципитация срещу коимунопреципитация
Имунопреципитацията и коимунопреципитацията са два вида техники, базирани на реакция на утаяване, които зависят от взаимодействието антиген-антитяло. Техниката на имунопреципитация утаява протеин от разтвора с помощта на специфично антитяло, докато техниката на коимунопреципитация утаява непокътнати протеинови комплекси от разтвора с помощта на специфично антитяло. И така, това обобщава разликата между имунопреципитация и коимунопреципитация.
