Ключова разлика – имуноцитохимия срещу имунохистохимия
Имуноцитохимията (ICC) и имунохистохимията (IHC) са две широко използвани техники в молекулярната диагностика, които идентифицират и потвърждават появата както на незаразни заболявания, така и на заразни заболявания въз основа на молекулните маркери, присъстващи в клетките. Ключовата разлика между имуноцитохимията и имунохистохимията е молекулата, която се използва като процедура за анализ в тези техники. В ICC се използват първични и вторични антитела, конюгирани с маркери като флуоресценция, докато IHC, моноклонални и поликлонални антитела се използват за диагностични определяния.
Какво е имуноцитохимия (ICC)?
ICC използва първични и вторични антитела, свързани с маркери като флуоресцентни маркери или ензими и е мощен метод за откриване за откриване на антигени, присъстващи в целевите клетки, които могат да бъдат или инфекциозни клетъчни частици, или ракови туморни клетки. За имуноцитохимия са необходими три типа контроли.
- Първично антитяло – контрола, която показва специфичността на първичното антитяло, свързващо се с антигена
- Вторично антитяло – контрола, която показва, че етикетът е специфичен за първичното антитяло
- Контроли за етикети – показват, че етикетирането е резултат от добавения етикет, а не резултат от ендогенно етикетиране.
Фигура 01: Имуноцитохимия маркира отделни протеини в клетките (тук тирозин хидроксилазата в аксоните на симпатиковите автономни неврони е показана в зелено).
Първичната контрола на антитялото е специфична за всяко ново антитяло и не може да се повтаря за всеки експеримент. Контролът на вторичното антитяло е проектиран въз основа на първичното антитяло, използвано в експеримента, и е включен във всеки експеримент. Контролът за етикетиране се включва, ако условие на процедурата се промени, пробата се промени или когато се открие неочаквано етикетиране.
Двете основни приложения на ICC са радиоимуноанализ (RIA) и ензимно свързан имуносорбентен анализ (ELISA). Най-често използваното антитяло е имуноглобулин G.
Какво е имунохистохимия (IHC)?
В имунохистохимията изходната проба съдържа моноклонални и поликлонални антитела, за да се определи наличието на антигени в чужди клетки. Тази техника се основава на специфичната реакция на свързване на антиген-антитяло. Антителата, използвани при откриването, могат да бъдат маркирани с различни маркери; те могат да бъдат флуоресцентни маркери, радиомаркирани маркери или химически маркери. Чрез улесняване на in vitro свързването между антигена и целевото антитяло може да се определи наличието или отсъствието на конкретен протеин в клетка.
Фигура 02: Имунохистохимично оцветяване на нормален бъбрек с CD10
В момента учените участват в разработването на таргетни антитела за специфични антигени, присъстващи в клетки, които могат или да се развият като злокачествени туморни клетки, или антигени, присъстващи в инфекциозни агенти като ХИВ.
Какви са приликите между имуноцитохимията и имунохистохимията?
- Реакциите са силно специфични и точни при ICC и IHC.
- Приложенията на ICC и IHC включват диагностика на рак и инфекциозни заболявания.
- Трябва да се поддържат стерилни условия и при двете състояния и те трябва да се извършват ин витро
- И двете техники осигуряват възпроизводими резултати.
- И двете са бързи.
- Радиомаркиране, флуоресцентни техники се използват като методи за откриване както в ICC, така и в IHC.
- И двете се основават на сдвояване антиген-антитяло.
Каква е разликата между имуноцитохимията и имунохистохимията?
Имуноцитохимия (ICC) срещу имунохистохимия (IHC) |
|
| ICC използва първични и вторични маркери, свързани с антитела, като флуоресцентни маркери или ензими и е мощен метод за откриване за откриване на антигени, присъстващи в целевите клетки. | IHC е метод, който използва моноклонални и поликлонални антитела за определяне на наличието на антигени, които са специални протеинови маркери, поставени върху клетъчните повърхности. |
| Примерен източник | |
| Проби, получени от тъкани, които са били хистологично обработени в тънки срезове, се използват в ICC. | IHC използва проби, състоящи се от клетки, отгледани в монослой или клетки в суспензия, които се отлагат върху предметно стъкло. |
| Обработка на проби | |
| В ICC клетките трябва да са пропускливи, за да улеснят проникването на антителата към вътреклетъчните цели. | При IHC клетките се фиксират във формалин, влагат се в парафин преди оцветяване. |
Резюме – Имуноцитохимия срещу имунохистохимия
Молекулярната диагностика се използва за идентифициране и потвърждаване на появата както на незаразни, така и на заразни заболявания въз основа на молекулните маркери, присъстващи в клетките. Молекулярните маркери могат да бъдат протеини или последователности от ДНК или РНК; развитието на технологии като ICC и IHC проправи пътя за учените да идентифицират болестта и нейната причина на ранен етап. Както ICC, така и IHC зависят от специфичните реакции между антитяло и антиген, въпреки източника на пробата. Основната разлика между имуноцитохимията и имунохистохимията е обработката на пробите при двете процедури.
Изтеглете PDF версия на Immunocytochemistry vs Immunohistochemistry
Можете да изтеглите PDF версия на тази статия и да я използвате за офлайн цели според бележката за цитиране. Моля, изтеглете PDF версия тук. Разлика между имуноцитохимия и имунохистохимия.
