Ключова разлика – RPMI срещу DMEM
Повечето научни изследвания включват култивиране на животински клетки и по този начин тези изследвания изискват поддържане на животински клетъчни линии при специални условия на растеж. Култивирането на животински клетки се извършва широко във фармакологичните изследвания за идентифициране на метаболизма на лекарствата, в диагностиката на заболявания и в изследванията на рака. Средата за клетъчна култура е важен аспект на културата на животински клетки. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) и Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) са две културни среди, използвани в култивирането на животински клетки. RPMI е среда, използвана широко за култивиране на клетки от бозайници в суспензионна култура. DMEM е модифициран вид базална среда с увеличени до четири пъти концентрации на аминокиселини и витамини. DMEM се използва при култивиране на клетки в прилепнали култури. Основната разлика между двете медии е типът култура на медиите. RPMI се използва за суспензионни култури, докато DMEM се използва за култивиране на прилепнали клетки.
Какво е RPMI?
RPMI или среда на Мемориалния институт на Розуел Парк също се нарича RPMI 1640. Името на медията е получено от института, в който е открита медията. Тази среда обикновено се използва в животински клетъчни култури, особено за растеж на клетки от бозайници. Първоначално те са разработени за отглеждане на човешки лимфоцити.
Следните съставки са включени в RPMI.
- Глюкоза
- pH индикатор (фенолно червено)\
- Соли (натриев хлорид, натриев бикарбонат, динатриев фосфат, калиев хлорид, магнезиев сулфат и калциев нитрат)
- Аминокиселини
- Витамини (i-инозитол, холин хлорид, пара-аминобензоена киселина, фолиева киселина, никотинамид, пиридоксин хидрохлорид, тиамин хидрохлорид, калциев пантотенат, биотин и рибофлавин, цианокобаламин)
Специалната характеристика на RPMI е повишената концентрация на фосфат в средата. RPMI се използва в атмосфера с 5% въглероден диоксид. Това ще осигури максимални и оптимални условия за растеж на клетките. pH на средата се поддържа на 8,0 от бикарбонатната буферна система.
Фигура 01: Клетъчна култура върху петриево блюдо
Приложения на RPMI в клетъчно култивиране
- Култивиране на човешки Т и В лимфоцити, клетки от костен мозък и хибридома.
- Използва се за изследване на човешки неопластични клетки.
Какво е DMEM?
Модифицираната среда на Eagle на Dulbecco (DMEM) е модифицирана среда, която се приготвя в търговската мрежа. Оригиналната текстура на средната пудра е жълта. В DMEM концентрацията на витамин се увеличава до четири пъти, като по този начин се увеличава съдържанието на хранителни вещества в средата.
DMEM също се модифицира чрез добавяне на повече соли като железен нитрат, натриев пируват и някои незаменими аминокиселини като серин и глицин. Съставът на глюкозата в средата също се променя. Оригиналната формула е съставена от 1000 mg/L глюкоза, докато в DMEM концентрацията е увеличена до 4500 mg/L. DMEM също изисква добавяне на серумна среда, тъй като не е пълна среда. Най-често DMEM се допълва с фетален телешки серум (FBS). FBS осигурява необходимите протеини и растежни фактори за процеса на култивиране.
PH на средата варира при добавяне на натриев бикарбонат. pH на средата преди добавяне на натриев бикарбонат е около 6,80 – 7,40, докато pH след добавяне на натриев бикарбонат е в диапазона 7,60 – 8,20. Температурата на съхранение на средата е 2 – 8 0C.
Фигура 02: DMEM
Приложения на DMEM
- За изследване на способността за образуване на плака на полиомавируса в миши ембрионални клетки.
- В проучвания за контактно инхибиране.
- В изследване и анализ на пилешки клетъчни култури.
Какви са приликите между RPMI и DMEM?
- Както RPMI, така и DMEM се използват в животински клетъчни култури.
- И двете среди RPMI и DMEM са течни формулировки.
- И двете среди RPMI и DMEM съдържат незаменимите аминокиселини, витамини и неорганични соли, необходими за растежа.
- Както RPMI, така и DMEM носителите са непълни. Следователно трябва да се добави серум.
- Както RPMI, така и DMEM медиите използват глюкоза като източник на въглерод.
- И двете среди RPMI и DMEM имат по-високо pH.
Каква е разликата между RPMI и DMEM?
RPMI срещу DMEM |
|
| RPMI е среда, използвана широко за култивиране на клетки от бозайници в суспензионна култура. | DMEM е модифициран тип базална среда с повишени концентрации на аминокиселини и витамини. |
| Наличие на допълнителни фосфати | |
| Присъства в RPMI. | Отсъства в DMEM. |
| Използвайте | |
|
Използва се за култивиране на клетки в прилепнали култури. Използва се за,
|
| Видове култура | |
| RPMI се използва за суспензионни култури. | DMEM се използва за култури с прилепнали клетки. |
Обобщение – RPMI срещу DMEM
Както RPMI, така и DMEM се използват широко в култивирането на животински клетки, особено за култивиране на животински клетъчни линии, включително лимфоцити in vitro. DMEM е модифицирана основна среда, където има повишена концентрация на хранителни вещества. RPMI, разработен от Мемориалния институт на Розуел Парк, също така е среда, използвана при култивиране на животински клетки, особено за лимфоцити от бозайници. И двете медии се предлагат в търговската мрежа. Това е разликата между RPMI и DMEM.
