Ключовата разлика между Pour plate и Spread plate е, че известен обем от пробата се разпръсква върху повърхността на агаровата среда в разпръснатата плака, докато в pour plate, известен обем от пробата се смесва с агар и след това се изсипва в чиния. Когато сравняваме точността на тези две техники, плочата за изливане има по-висока точност от плочата за разпръскване.
Стандартният метод за преброяване на блюдото е основан на растежа подход, който отчита броя на живите (растящи/култивируеми/жизнеспособни) микроорганизми в проба. Това е мощен метод, който се използва в много микробиологични области за анализиране на броя на живите микроорганизми. Области като храна и млечни продукти, медицина, околна среда, водна и селскостопанска генетика, микробна генетика, молекулярна микробиология, развитие на растежни среди и биотехнологии (биореакторна технология, ферментация, пречистване на отпадъци/отпадъчни води и т.н.) използват тази техника. Освен това има два основни начина за извършване на стандартно преброяване на плочата: те са Техника на разпръскване на плоча и Техника на изливане на плоча.
Какво е Pour Plate?
Техниката на изливане на плоча е микробен метод за изброяване на някои жизнеспособни клетки, налични в проба. Особеността на метода за изливане на плоча е, че известен обем от пробата първо се смесва с агар и след това се излива в плочата.
Фигура 01: Плоча за изливане
Другите стъпки са подобни на техниката за разстилане на плочата, обсъдена в следващия раздел. Следващата стъпка след изливането на агара, смесен с пробата, е да се остави да се втвърди и да се инкубира. След инкубацията, преброяването на броя на жизнеспособните колонии е от съществено значение за изчисляване на крайната CFU за 1 g или 1 ml.
Какво е Spread Plate?
Spread plate е техника за изброяване на жизнеспособни клетки в проба. За тази техника е необходимо серийно разреждане на пробата, за да се гарантира, че поне една води до изброим брой колонии. Процесът тук е да се пипетира определен обем от разреждането върху повърхността на плоча с агар и да се разпръсне бързо и равномерно върху повърхността на агар със стъклен разпръсквач, който е бил запален в алкохол и охладен. Извършването на репликите е необходимо за получаване на надеждна средна стойност. Следващата стъпка е да изсушите тези плаки за кратък период от време и след това да ги обърнете и да ги поставите в инкубатор при подходяща температура за растеж и за определен инкубационен период.
Фигура 02: Плоча за разпространение
След инкубация изследването на плочите ще покаже растежа. При едно или повече разреждания, броят на клетките, присъстващи в инокулантите (напр. 100 или 200 μl), ще доведе до между 30 и 300 отделни колонии върху повърхността на агара. Преброяването на по-малко от 30 колонии е статистически ненадеждно. Преброяванията над 300 са трудни за изброяване и податливи на грешки.
Какви са приликите между плоча за изливане и плоча за разстилане?
- Разстиланата плоча и леещата плоча са две техники за получаване на брой жизнеспособни клетки, присъстващи в пробата.
- И двата метода са прости.
- Грешки при извадката могат да възникнат и при двата метода.
- Ограниченията на условията на растеж влияят на резултата и от двата метода.
- Техническите грешки също могат да попречат на крайния резултат и на двата метода.
- Въпреки че са жизнеспособни, двата метода не се използват за отглеждане на некултивирани бактерии.
Каква е разликата между плоча за изливане и плоча за разстилане?
Плочката за изливане е микробна техника за изброяване на брой жизнеспособни клетки в проба. Техниката на разпръснато блюдо е друга техника за изброяване на бактериите, отглеждани на повърхността на средата. При техниката на изливна плоча процесът е да се добави пробата върху повърхността на втвърдената среда върху изливната плоча. Но в техниката на разпръснато блюдо, процесът е да се смеси пробата с разтопения агар и след това да се излее в блюдото.
По отношение на точността на тези две техники, плочата за изливане има по-висока точност от плочата за разпръскване. Освен това, за разлика от плочата за изливане, се използва стъклен разпределител за равномерно разпръскване на пробата върху повърхността върху плоча за разпръскване. Освен това, като се използва изливна плоча, е възможно да се изброят аеробите, анаеробите и факултативните анаероби. Въпреки това, като се използва таблото за разпространение, е възможно само да се изброят аеробите. Освен това са необходими плочи с втвърден агар за извършване на плоча за разпръскване, докато за метода на изливане са необходими течни разтопени агарови среди.
Обобщение – Плоча за изливане срещу Плоча за разстилане
Pour plate и Spread plate са две техники в микробиологията за улесняване на изброяването на микробните клетки в проба. И двата метода се основават на растежа, следователно измервайте жизнеспособните клетки. По време на плочата за изливане известен обем от пробата се смесва с разтопения агар и се излива в плочата. По време на плаката за разпръскване, известен обем се разстила върху повърхността на втвърдената агарна среда. Това е разликата между плоча за изливане и плоча за разпръскване.
