Ключовата разлика между изократното и градиентното елуиране е, че изократичното елуиране се отнася до поддържане на постоянна концентрация в подвижната фаза, докато градиентното елуиране се отнася до поддържане на различна концентрация в подвижната фаза.
Термините изократно и градиентно елуиране се използват в хроматографията. По време на хроматографски цикъл използваме неподвижна фаза, която е неподвижно вещество, заедно с подвижна фаза, движещото се вещество. Изократното и градиентното елуиране описва свойствата на подвижната фаза.
Какво е Isocratic елуиране?
Изократично елуиране е термин, използван в хроматографията, когато подвижната фаза има постоянна концентрация. Тук концентрацията на подвижната фаза е постоянна през целия хроматографски процес. В този процес можем да наблюдаваме ширината на пика, нарастваща с времето на задържане линейно в хроматограмата. Това обаче води до недостатък – пиковете при късно елуиране за късно елуиране стават много плоски и широки. Следователно тези широки пикове стават трудни за разпознаване като пикове.
Освен това, при изократно елуиране селективността не се променя според размерите на колоната. Това означава, че селективността не зависи от промените в размерите на колоните. Тук дължината и диаметърът се считат за размери на колоната. Следователно, пиковете се елуират в същия ред.
Какво е градиентно елуиране?
Градиентно елуиране е термин, използван в хроматографията, когато тук подвижната фаза има различна концентрация. С други думи, концентрацията на подвижната фаза не трябва да остава постоянна. Например, при HPLC, общ метод за разделяне използва метанол 10% първоначално и завършва при 90%, като концентрацията се увеличава постепенно. Подвижната фаза има два компонента: слаб разтворител и силен разтворител. Слабият разтворител позволява на разтвореното вещество да се елуира бавно, докато силният разтворител причинява бързото елуиране на разтвореното вещество. При обратнофазовата хроматография ние използваме вода като слаб разтворител и органичен разтворител като силен разтворител.
Фигура 01: HPLC
Освен това, методът на градиентно елуиране намалява по-късно елуиращите се компоненти, за да ги накара да се елуират по-бързо, давайки тесен пик в хроматограмата. Този метод подобрява формата на пика и височината на пика. Освен това, при техниката на градиентно елуиране, редът на елуиране се променя с промените в размерите на колоната.
Каква е разликата между изократично и градиентно елуиране?
Термините изократно и градиентно елуиране се използват в хроматографията. Изократното и градиентното елуиране описват свойствата на подвижната фаза. Ключовата разлика между изократното и градиентното елуиране е, че изократичното елуиране се отнася до поддържането на постоянна концентрация в подвижната фаза, докато градиентното елуиране се отнася до поддържането на различна концентрация в подвижната фаза.
При техниката на изократно елуиране ширината на пика се увеличава линейно с времето на задържане. Въпреки това, при техниката на градиентно елуиране, задържането на компонентите, които се елуират по-късно, е намалено, така че елуирането става по-бързо и дава тесни пикове. Освен това при изократното елуиране селективността не зависи от размерите на колоната, но при градиентното елуиране селективността се променя с промяна на размерите на колоната.
Следващата таблица обобщава разликата между изократно и градиентно елуиране.
Обобщение – Изократично срещу градиентно елуиране
Изократичното елуиране и градиентното елуиране описват свойствата на подвижната фаза. Ключовата разлика между изократното и градиентното елуиране е, че изократичното елуиране се отнася до поддържането на постоянна концентрация в подвижната фаза, докато градиентното елуиране се отнася до поддържането на различна концентрация в подвижната фаза.
