Ключовата разлика между GFP и EGFP е, че GFP е див тип протеин, включен в молекулярното клониране на клетки на небозайници, докато EGFP е подобрен или конструиран тип GFP, който може да се използва върху клетки на бозайници.
Молекулярното клониране е усъвършенствана техника, която учените използват изключително много за експресиране на протеини чрез рекомбинантна технология. В рекомбинантната ДНК технология е необходимо рекомбинантният вектор да се трансформира успешно в организма гостоприемник. Следователно, по време на процеса на трансформация, трябва да се идентифицира и потвърди дали генът, който представлява интерес, е бил трансформиран или не в гостоприемника. За да оценят това, молекулярните биолози приемат няколко техники. От тези техники една е репортерният ген. Тези репортерни гени действат като избираеми маркери за избор на правилните трансформанти. Така зеленият флуоресцентен протеин (GFP) и подобреният зелен флуоресцентен протеин (EGFP) са два репортерни протеина, използвани в молекулярното клониране.
Какво е GFP?
GFP е протеин от див тип, който съдържа 238 аминокиселинни остатъка и няколко избираеми области от аминокиселинни последователности, които го отличават от другите флуоресцентни протеини. Освен това, този протеин от див тип първоначално е бил изолиран от Aequorea Victoria; вид медуза. Въпреки това, при природни явления, медузите са били в състояние да произведат зелена цветна флуоресценция в отговор на определени стимули.
По-рано тази концепция изненада учените и те решиха да я използват в своите рекомбинантни ДНК технологии. Следователно учените са използвали тази мутантна форма на гена от див тип като репортерен ген в своите изследвания на генната експресия. Генът от див тип на GFP е способен да произвежда протеин, който дава флуоресценция при стайна температура или под ултравиолетова светлина. Следователно, когато се вмъкне в трансформантите, той експресира и произвежда флуоресценция. Ако флуоресценцията се появи след процеса на трансформация, това потвърждава успеха на процеса на трансформация. С прости думи, флуоресцентното излъчване сигнализира за успешната трансформация на вектора, който пренася интересния ген в гостоприемника.
Фигура 01: GFP
Поради тази причина GFP действа като in vivo маркер за генна експресия. Понастоящем се използват техники за генно инженерство за производство на GFP. Освен това са налични много подобрени версии на GFP, като EGFP. Следователно, това позволява ефективно използване на GFP в молекулярно клониране и изследвания на генната експресия.
Какво е EGFP?
Подобреният зелен флуоресцентен протеин или EGFP е подобрена версия на GFP. С прости думи, можем да определим EGFP като инженерна версия на GFP от див тип. Когато дивият тип ген на GFP мутира, той произвежда благоприятни ефекти. Следователно, мутиралият ген на GFP позволява експресията на нови знаци и в резултат на това можем да произведем Enhanced GFP с подобрени характеристики. Освен това можем успешно да въведем мутации в дивия тип GFP ген, използвайки облъчване или химически методи. След това тези мутирали гени произвеждат EGFP, който има по-полезни характеристики.
Фигура 02: EGFP
Подобрените характеристики на EGFP са както следва;
- Може да излъчва по-силни флуоресцентни сигнали.
- Има висока чувствителност.
- Може да се използва върху клетки на бозайници вместо прокариоти и други еукариоти от по-ниско ниво.
- Също така осигурява повишена чистота на продукта.
Следователно, в сравнение с GFP, EGFP е предпочитаният избор за изследвания на генната експресия. Продуктът обаче е по-скъп в сравнение с GFP.
Какви са приликите между GFP и EGFP?
- GFP и EGFP са два протеина, които имат способността да излъчват зелен цвят
- Следователно и двата функционират като репортерни протеини в изследванията на генната експресия.
- Също така е възможно да се синтезират и двете чрез рекомбинантна ДНК технология.
- Освен това е лесно тези два типа да бъдат допълнително мутирани, за да се синтезират подобрени форми.
Каква е разликата между GFP и EGFP?
Репортерният ген е ген, който се свързва с гена, представляващ интерес в рекомбинантната ДНК технология. Той сигнализира за успешната трансформация на рекомбинантния вектор към гостоприемника. Тук GFP и EGFP са два вида зелени флуоресцентни протеини, които работят като репортерни протеини. Ключовата разлика между GFP и EGFP обаче е, че GFP е див тип, докато EGFP е разработена версия на GFP. Освен това EGFP има по-полезни характеристики от GFP. Например EGFP произвежда по-силна флуоресцентна светлина и е по-чувствителен от GFP. Друга разлика между GFP и EGFP са системите, в които можем да ги използваме. Системите без бозайници използват GFP, докато системите на бозайници използват EGFP.
Инфографиката по-долу представя разликата между GFP и EGFP в таблична форма.
Резюме – GFP срещу EGFP
GFP и EGFP са репортерни протеини в изследванията на молекулярното клониране и генната експресия. GFP е протеин от див тип, който е зелен флуоресцентен протеин. Протеинът първоначално е бил изолиран от медузата Aequorea victoria. Обратно, EFGP е подобрена форма на GFP протеин. Това е мутант от див тип с подобрени характеристики. Следователно EFGP има по-висока сила на сигнала и по-висока чувствителност. Следователно можем да го използваме върху вектори от бозайници. За разлика от това, използването на GFP е главно само върху вектори, които не са бозайници. Като цяло това е разликата между GFP и EGFP.
